Leica倒置显微镜是一种特殊设计的显微镜,其物镜位于载物台下方,而光源和聚光器位于载物台上方,与普通显微镜结构相反。这种设计使其特别适用于观察培养皿、培养瓶中的活细胞及较厚的生物样本,在细胞生物学、组织工程、药物筛选等领域得到广泛应用。
倒置显微镜的核心优势在于其长工作距离物镜,能够直接对培养容器中的细胞进行观察,无需将细胞转移至载玻片,减少了样本处理步骤,更有利于保持细胞的活性与自然状态。同时,倒置显微镜支持多种观察模式,如明场、相差、荧光、微分干涉(DIC)等,可满足不同的实验需求。例如,相差观察无需染色即可清晰呈现活细胞结构,荧光观察则可对特定蛋白或细胞器进行标记分析。
Leica倒置显微镜的技术特点主要体现在以下几个方面:
1、光学系统
优质镜头:采用高分辨率、高数值孔径的物镜和目镜,能够提供清晰、锐利的图像,细节还原度高,有助于观察微小结构和细胞内的细节变化。例如,在观察细胞切片时,能清晰地分辨出细胞核、细胞质中的细胞器等结构。
长工作距离:物镜和聚光镜采用长工作距离设计,这使得在观察培养皿或培养瓶等容器中溶液里的细胞或微生物时,物镜不易与容器接触,可避免对样本造成损伤,同时也方便进行活细胞观察和实时成像等操作。
多种照明方式:通常配备底部照明或侧面照明,光线均匀且能有效减少照射光线对样品的伤害4。部分型号还具有反射式照明系统,通过反射镜和激光等光源照射到样品上,可获得更清晰、高对比度的影像,适用于观察细胞内部结构和微小颗粒。
2、机械结构
稳固支架:支架设计稳固,能够承受一定重量的样本,并确保在使用过程中不会晃动或移位,为观察提供稳定的支撑,保证成像质量。
精细调焦:调焦系统通常采用精密的齿轮结构,使焦距调节更加精细,用户能够轻松获取清晰的观察效果,无论是对不同厚度的样本进行聚焦,还是在观察过程中进行微调,都能准确操作。
人性化设计:如Leica DMi3000 B研究级倒置显微镜,其镜筒观察角度可调,用户可根据自身需求调整至最佳观察姿势;载物台驱动装置和调焦旋钮的布局合理,方便单手操作,且能防止相互干扰。
3、功能特性
模块化设计:如Leica DMi8等型号是高度模块化倒置式研究显微镜,可根据用户的具体需求和应用,灵活添加或更换不同的功能模块,如荧光模块、微分干涉对比(DIC)模块等,满足多种实验需求。
多种观察方法:支持明场、暗场、相位对比、微分干涉对比(DIC)、荧光和调制对比等多种对比方法,并且可快速切换,为用户提供丰富的观察手段,以适应不同类型的样本和研究目的。
智能软件支持:配备专业的图像采集和分析软件,如Leica Application Suite(LAS)X软件,可对图像进行实时采集、处理、分析和存储,还能实现自动化操作和定量分析,提高研究效率和准确性。
4、样本适应性
大样本观察优势:由于光学元件位于载物台下方,工作距离较大,可对大型和重型样本进行成像,相比正置显微镜,在处理较大且较重的样本,或样本尺寸和重量差异较大时,具有更大的自由度。
减少样本制备:只需制备样本的一侧,即可更轻松地对大型样本成像,节省了样本制备的时间和成本,例如在材料科学和工业制造中观察大型零件或零部件时,无需对样本进行复杂的包埋和切割等处理。
5、操作便捷性
简单易用:操作相对简单,只需将样本摆放于载物台上,对焦表面进行成像即可,所有其他样本的焦距可保持不变,减少了操作步骤和时间,即使是未经培训的操作员也能较快上手。
安全保护:物镜位于载物台下方,得到了更多的保护,降低了物镜压迫样本的风险1。部分型号还具有上方对焦停止功能,通过定义转换器的上止点来提供额外的安全性,避免对样本和物镜造成损坏。
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