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程序降温仪用于实现生物样本的冷冻保存

来源：无锡爱思科低温科技有限公司 2025年05月20日 13:35

　　程序降温仪通过精确控制降温速率，避免生物样本在冷冻过程中因冰晶损伤或渗透压变化而失活。以下是其实现冷冻保存的具体步骤及关键技术要点：

　　一、程序降温仪冷冻保存的核心原理：

　　低温保护剂预处理：

　　使用渗透性保护剂和非渗透性保护剂,减少冰晶形成并稳定细胞内渗透压。

　　可控降温速率：

　　通过降温仪设定多阶段降温程序,避免快速冷却导致胞内冰晶损伤或慢速冷却引起溶液效应.

　　低温储存：

　　最终将样本转移至液氮或超低温冰箱长期保存。

　　二、程序降温仪具体操作步骤：

　　1. 样本准备与加载

　　平衡渗透压：

　　将生物样本与冷冻保护剂逐步混合，室温下缓慢平衡,避免渗透休克。

　　分装与标记：

　　将样本分装至无菌冻存管或麦管（避免过多液体导致降温不均），标记名称、浓度、日期等信息。

　　2. 程序降温仪设置

　　选择预设程序：

　　根据样本类型选择标准程序,或自定义多阶段降温参数.

　　传感器校准：

　　确保冻存管与降温仪探头直接接触（如插入专用样品架），实时监控温度变化。

　　3. 降温执行与监控

　　启动程序：

　　将装载样本的冻存管放入降温仪样品槽，启动程序后自动按设定速率降温。

　　关键参数记录：

　　实时记录温度曲线、降温速率及样本状态（部分高*设备配备可视化摄像头）。

　　避免温差突变：

　　确保冻存管与降温仪接触紧密，避免因空气间隙导致局部过冷或升温。

　　4. 超低温储存

　　液氮冷冻：

　　降温至-40℃以下后，迅速将样本浸入液氮（或液氮蒸汽相），避免冰晶再生长。

　　长期存储：

　　将样本转移至液氮罐或-80℃冰箱，定期补充液氮并监控温度稳定性。

　　5. 复苏验证

　　快速解冻：

　　从液氮中取出样本后，立即置于37~40℃水浴中快速摇晃解冻（防止冰晶形成）。

　　活性检测：

　　通过台盼蓝染色、流式细胞术或培养法验证细胞存活率。

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