以下是使用奥林巴斯 SZ61 显微镜观察小鼠解剖血管的方法:
1.观察前准备
样品制备:将小鼠进行解剖,暴露需要观察的血管部位。为了更好地观察血管结构,可以对血管进行适当的处理,如注射染料使血管显色,或者进行固定、切片等操作。如果是观察血管切片,需将切片放置在载玻片上,并滴加适量的生理盐水或封片剂,盖上盖玻片。
显微镜检查与调节:
打开电源:开启显微镜主电源,通过亮度调节旋钮将光源亮度调至合适水平,初始时可设置为较低亮度,后续根据观察情况再进行调整。
选择照明模式:根据样品的特点和观察需求,选择合适的照明模式,如明场模式适用于观察一般的血管结构,暗场模式则可以突出血管的边缘和细节,对于观察透明或折射率差异较小的血管组织可能更有帮助。
调节目镜管:调节目镜管的高度和视距,使两只目镜的像视距适合使用者的眼睛间距和视力。同时,调整瞳孔间距,直到两眼所观察到的图像重合。
2.观察步骤
低倍镜观察:
放置样品:将制备好的小鼠血管样品放在载物台上,用压片夹固定好,确保样品位于载物台的中心位置,以便于观察。
粗调焦:转动粗调焦旋钮,快速大范围地调节焦距,使样品大致成像。在调节过程中,要从侧面观察物镜与样品之间的距离,防止物镜碰撞到样品。
找到目标:通过目镜观察,同时移动载物台,找到需要观察的血管区域。低倍镜下可以先观察血管的整体分布和大致形态,确定感兴趣的部位,以便进一步在高倍镜下观察细节。
高倍镜观察:
1.切换物镜:在低倍镜下找到目标后,根据需要转动变倍旋钮,将放大倍数切换到合适的高倍镜(如使用 10 倍目镜时,可将总放大倍数从低倍切换到 45 倍左右)。
微调焦:使用微调焦旋钮进行精细的焦距调整,直至血管的细节清晰成像。在高倍镜下,可以观察到血管的管壁结构、内皮细胞等更细微的特征。同时,可根据观察情况,适当调整光源亮度和对比度,以获得更好的观察效果。
2.LV2000显微镜相机观察与记录:仔细观察血管的形态、结构和相关特征,如血管的管径大小、管壁的厚度、血管内的血液流动情况(如果是新鲜样品且条件允许的话)等。可以使用绘图或拍照的方式记录观察结果,以便后续分析和对比。如果显微镜配备了数码摄像头和成像软件,可以通过软件设置图像的分辨率、色彩模式、对比度、亮度等参数,然后进行图像采集和保存。
3.注意事项
避免镜头污染:在观察过程中,要注意避免样品上的液体或其他物质污染镜头。如果不小心污染了镜头,应及时用干净的擦镜纸轻轻擦拭,必要时可使用专门的镜头清洁液,但要注意使用方法,避免损坏镜头。
防止样品干燥:如果观察的是新鲜的小鼠血管样品,要注意保持样品的湿润,防止其干燥。可以在观察过程中适时滴加生理盐水或其他合适的保湿液。
4.小心操作:在调节焦距和移动载物台时,要动作轻柔,避免剧烈震动或碰撞,以免损坏样品或显微镜部件。
注意生物安全:小鼠解剖过程中要遵循生物安全规范,对使用过的器械和样品进行妥善处理,防止生物污染。观察完毕后,关闭电源,及时清理载物台和显微镜表面,保持显微镜的清洁。
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