CheKine™ 过氧化氢酶 (CAT) 活性分析：解析细胞抗氧化防御体系关键酶活性

来源：亚科因（武汉）生物技术有限公司 2025年05月19日 17:12

一、试剂盒概述

CheKine™ 过氧化氢酶 (CAT) 活性分析试剂盒（微量法）是一种用于检测样本中过氧化氢酶（CAT）活性的工具。CAT 是一种关键的抗氧化酶，广泛存在于含有细胞色素系统的好氧细胞中，能够催化过氧化氢（H₂O₂）分解为水和氧气。H₂O₂ 对细胞具有高度毒性，其积累会导致细胞内 DNA、蛋白质和脂质等靶标的氧化损伤，进而引发诱变和细胞死亡。CAT 通过清除细胞内的 H₂O₂，为细胞提供氧化损伤保护，在细胞的抗氧化防御体系中发挥着不可替代的作用。该试剂盒采用微量法，具有操作简便、灵敏度高和特异性强等优点，适用于多种生物样本的检测。

二、检测原理

在该试剂盒中，CAT 催化 H₂O₂ 分解为水和氧气。通过特定的显色底物与反应体系中的中间产物相互作用，生成具有特征颜色的产物。该产物在特定波长处具有最大吸收峰，吸光度值与 CAT 活性成正比。通过测定该波长处吸光度的变化，可准确反映 CAT 的活性。

三、实验步骤

（一）样本准备

细胞样本：收集细胞并用适当的裂解液裂解，制备细胞裂解液。确保裂解过程完整，以充分释放 CAT。
组织样本：取适量组织样本，用生理盐水冲洗以去除表面杂质，然后将其匀浆化并进行裂解处理，制备组织裂解液。
微生物样本：对于微生物样本，需进行适当的培养和处理，以确保 CAT 的有效提取。

（二）试剂准备

试剂配制：按照试剂盒说明书的要求，配制所需的检测试剂，包括反应缓冲液、显色底物和 H₂O₂ 溶液等。
试剂预冷：将配制好的试剂预冷至 4℃，以减少非特异性反应并保持酶的活性。

（三）反应体系设置

体系构建：在检测板或适当容器中，加入样本和试剂盒提供的反应试剂，轻柔混匀以确保充分接触和反应。
反应条件：在特定温度（通常为 37℃）下孵育反应体系，保证反应的顺利进行。孵育时间需严格按照试剂盒说明书进行控制。

（四）检测

吸光度检测：使用酶标仪或分光光度计，在特定波长下测定反应体系的吸光度值。
标准曲线绘制：利用试剂盒提供的标准品，按照说明书进行系列稀释并检测，绘制标准曲线。标准曲线用于将检测到的光信号转换为 CAT 的具体活性值。

四、实验结果解读

酶活性计算：根据测得的吸光度值和标准曲线，结合公式，计算样本中 CAT 的活性。
结果分析：CAT 活性的变化可以反映细胞的抗氧化能力。在氧化应激状态下，CAT 活性可能增加；而在某些疾病状态下，CAT 活性可能异常，导致氧化应激水平升高。
注意事项：实验过程中要严格控制反应条件，防止样本之间的交叉污染。同时，设置适当的对照组，以消除非特异性因素对实验结果的干扰。

五、应用领域

CheKine™ CAT 活性分析试剂盒（微量法）具有高灵敏度、操作简便和样本需求量少等优点，广泛应用于以下几个领域：

抗氧化研究：用于分析细胞在不同生理状态下的抗氧化能力，揭示抗氧化防御机制。
疾病诊断与研究：辅助诊断与氧化应激相关的疾病，如神经退行性疾病、心血管疾病和癌症等，并研究疾病发生发展过程中的氧化应激变化。
药物筛选：评估药物对 CAT 活性的影响，筛选具有潜在抗氧化作用的化合物。
毒理学研究：研究化学物质对细胞抗氧化能力的毒性作用，评估其潜在危害。

免责声明

凡本网注明“来源：化工仪器网”的所有作品，均为浙江兴旺宝明通网络有限公司-化工仪器网合法拥有版权或有权使用的作品，未经本网授权不得转载、摘编或利用其它方式使用上述作品。已经本网授权使用作品的，应在授权范围内使用，并注明“来源：化工仪器网”。违反上述声明者，本网将追究其相关法律责任。
本网转载并注明自其他来源（非化工仪器网）的作品，目的在于传递更多信息，并不代表本网赞同其观点和对其真实性负责，不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时，必须保留本网注明的作品第一来源，并自负版权等法律责任。
如涉及作品内容、版权等问题，请在作品发表之日起一周内与本网联系，否则视为放弃相关权利。