前处理宝典 | 食品中丙烯酰胺的测定

近日，GB 5009.204《食品安全国家标准 食品中丙烯酰胺的测定》征求意见稿出台。相较于旧版，主要改进为以下3点：

★ 增加了适用范围——咖啡、茶叶、食糖、婴幼儿配方食品和婴幼儿辅助食品

★ 增加了基质分散固相萃取净化方法，以满足所有食品中丙烯酰胺的测定

★ 删除了第一法“离子阱串联质谱仪”

本文主要介绍岛津QuEChERS-LCMS/MS法测定咖啡中丙烯酰胺的方案。

参考GB5009.204正文3.5.3中关于净化管的描述和5.3.1中提取盐的描述，我司对应产品信息如下：

*盐包：380-00154-01, SHIMSEN QuEChERS Ext-Salts Packets with 50mL Tube, 4g Na2SO4, 0.5g NaCl, 50/P

*净化管：380-05300-12，SHIMSEN QuEChERS dSPE, 15 mL, 20mg GCB, 150mg C18, 150mg PSA, 150mg MCX, 50/p

*针头滤器：380-00341，SHIMSEN Disc Hydrophilic PTFE, 13 mm, 0.22 μm  100/box

注意事项：

1、速溶咖啡、乳粉等基质可直接取样提取，焙烤、膨化、油炸、茶叶和糖类等食品、需经过干冰冷冻粉碎后提取

2、如无法通过离心获得上清液，如速溶咖啡、婴幼儿乳粉等基质样品，则取混悬液待净化。

2.1仪器

岛津超高效液相色谱仪LC-40与三重四极杆质谱仪LCMS-8050联用系统。具体配置为:

系统控制器:CBM-40lite

脱气机:DGU-40A

输液泵：LC-40D XSx2

自动进样器:SIL-40CXS

柱温箱：CTO-40S

色谱工作站：LabSolutions Ver.5.120

2.2 分析条件

液相色谱条件：

色谱柱：Shim-pack GIST-HP C18-AQ柱

（150mmx2.1mml.D，3μm）（P/N：227-30765-04）；

流动相：A-0.1%甲酸水溶液；B-甲醇

流速：0.2mL/min

柱温：30℃

进样体积：10μL

洗脱方式：梯度洗脱，B相初始浓度为2%，时间程序见表1。

3.1 MRM 色谱图

通过优化液相条件，将丙烯酰胺出峰时间控制在 4min 以后，避免样品中的杂质干扰。色谱图如下图所示。

3.2 样品和加标回收测试

对咖啡样品进行分析和加标回收测试，结果如表 1所示。分别进行 20、100、200 μg/g 的添加回收测试，每个条件重复 3 次，回收率为86.2%~95.6%，RSD为 1.28%~5.69%。

3.3 结论

本文使用岛津超高效液相色谱仪LC-40与三重四极杆质谱仪LCMS-8050联用系统，建立了咖啡中丙烯酰胺的测定方法。咖啡样品经提取后，采用QuEChERS法进行净化后上机，内标法定量。丙烯酰胺在2-500μg/L浓度范围内，相关系数为0.9999，检出限为0.2μg/L；保留时间和峰面积重复性分别为0.15-0.22%和0.62-1.29%。咖啡样品经测试检出丙烯酰胺，进行了 20、100、200μg/kg的加标回收测试，回收率为86.2-95.6%，RSD为1.28-5.69%。该方法可用于咖啡中丙烯酰胺的测定。