精准检测 CK 活性，助力心脑疾病研究

一、试剂盒概述

CheKine™ 肌酸激酶 (CK) 活性检测试剂盒（微量法）是一种用于检测样本中肌酸激酶 (CK) 活性的工具。CK 主要存在于心脏、肌肉以及脑等组织中，能可逆地催化肌酸与 ATP 之间的转磷酰基反应，在能量运转、肌肉收缩和 ATP 再生中发挥重要作用，是临床诊断心脑疾病的一个重要指标。该试剂盒采用微量法，具有操作简便、灵敏度高和特异性强等优点，适用于多种生物样本的检测。

二、检测原理

CK 催化肌酸与 ATP 之间的转磷酰基反应，生成磷酸肌酸和 ADP。该反应体系中加入特定的底物和辅助因子，在特定波长下检测吸光度的变化，以此反映 CK 的活性。

三、实验步骤

（一）样本准备

1. 血清（浆）样本 ：采集血液样本，静置凝固后离心取上清液（血清）；或采集血液后立即加入抗凝剂，混匀后离心取上清液（血浆）。样本应避免溶血，溶血可能影响检测结果的准确性。

2. 组织样本 ：称取适量组织，用预冷的生理盐水洗涤，按质量体积比加入组织裂解液，冰上充分匀浆，离心取上清液。

3. 细胞样本 ：收集细胞，用生理盐水洗涤，加入细胞裂解液，吹打混匀，冰上裂解，离心取上清液。

（二）试剂准备

1. 试剂配制 ：按照试剂盒说明书的要求，配制相应的试剂，如工作液、底物溶液、辅助因子溶液等。

2. 试剂预温 ：将配制好的试剂置于室温下预温至 25℃左右，以确保反应体系的温度稳定，避免温度变化对酶促反应的影响。

（三）反应体系设置

1. 反应体系组成 ：在微量反应板或适当容器中，依次加入样本、工作液、底物溶液和辅助因子溶液，轻轻混匀。

2. 反应条件 ：将反应体系置于合适温度（一般为 37℃）下孵育一定时间，使反应充分进行。

（四）检测

1. 吸光度检测 ：使用酶标仪或分光光度计，在特定波长下测定反应体系的吸光度值。

2. 标准曲线绘制 ：使用试剂盒提供的标准品，按照说明书的要求进行稀释和检测，绘制标准曲线。

四、实验结果解读

1. 酶活性计算 ：根据测得的吸光度值和标准曲线，结合公式，计算样本中 CK 的活性。

2. 结果分析 ：CK 活性的变化可反映心脑等组织的健康状况。例如，在心肌梗死、脑梗死等疾病中，CK 活性可能显著升高；在肌肉损伤等情况下，CK 活性也可能增加。

3. 注意事项 ：实验过程中需严格控制反应条件，避免样本之间的交叉污染。同时，应设置适当的对照组，以确保实验结果的准确性和可靠性。

五、应用领域

CheKine™ 肌酸激酶 (CK) 活性检测试剂盒（微量法）具有操作简便、灵敏度高和特异性强等优点，适用于以下领域：

1. 临床诊断 ：作为心脑疾病诊断的重要指标，辅助医生诊断心肌梗死、脑梗死等疾病。

2. 疾病研究 ：用于研究心脑疾病的发病机制和进展。

3. 药物筛选 ：评估药物对 CK 活性的影响，筛选潜在的心脑保护药物。

4. 毒理学研究 ：研究化学物质对心脑组织的毒性作用。