各位科研伙伴,类器官培养试剂选择记住三个黄金法则,2 分钟掌握关键 ——
一、基质胶:搭好三维 “脚手架”
天然基质(如 Matrigel)像真实细胞外基质,选它看两点:
✓ 硬度适配:肠类器官用软基质(浓度 1.2-2.4 mg/mL),肝类器官用中等硬度,别搞错!
✓ 批间稳定:必须选低内毒素(<5 EU/mL)、无支原体的批次,到手先测成球率,1000 个细胞 72 小时成球>80% 才合格。
合成基质(如 PEG 水凝胶)成分纯、无动物源,适合培养或研究基质单独作用。
二,培养基:配好营养 “信号餐”
基础培养基按器官选:肠胃用 MEM/NEAA,肝肾用 DMEM/F12,都要无酚红、低糖版。
关键生长因子是灵魂:
✓ 肠肺类器官离不开 Wnt 激动剂(R-spondin 1+Noggin),纯度>95% 才有效;
✓ 分化期加对应因子,比如肾类器官加 BMP-7,胰腺类器官抑制 TGF-β,浓度随阶段调。
传代时加 Y-27632,24 小时内提高贴壁存活率,新手可用!
三,质量控制:避开试剂 “雷区”
✓ 安全性:内毒素<1 EU/mL(高了类器官会发炎),无菌检测做 14 天,支原体用 MycoAlert 快筛;
✓ 功能性:成球率>80%,还要有典型结构(比如肠类器官长隐窝),测基因确保没 “长歪”;
✓ 批间稳定:同一批试剂传 10 代以上,别让类器官越养越差。
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