细胞计数仪怎么选？

来源：上海牧荣生物科技有限公司 2025年05月13日 12:33

1、测试细胞类型

在选择仪器之前，我们首先要思考两个问题：

1、自己的细胞房培养哪些细胞？

一般实验室细胞房培养的大多为常规传代培养的细胞系，比如肿瘤细胞、动物哺乳细胞、昆虫细胞等，这类细胞直径范围在5-40μm。

还有一些可能是从组织或血液分离的原代细胞，比如脾细胞、PBMC细胞、脐带血或骨髓源的原代间充质干细胞等；这类细胞组分复杂，可能有组织碎片、血小板、红细胞等杂质干扰。

最后呢，还有一些老师在某些细分领域计数需求，比如酵母细胞（2-6μm）、T细胞（6-10μm)球藻细胞、芽孢杆菌等微生物小粒径细胞（1-10μm），甚至低于1μm 的大肠杆菌。

我们根据培养细胞类型的直径大小，第一步要确认合适的物镜放大倍数，就跟在显微镜下有4X、10X、40X和100X不同放大倍数一样，需要选择一个正确的物镜来满足成像清晰和识别。正常的细胞系和原代细胞计数仪采用5X物镜光学放大就可满足，针对酵母和球藻以及一些粒径更小的微生物样本，需要用到10X甚至20X物镜才能够看的清晰。

2、细胞分析是关注细胞活率还只是细胞浓度？

细胞计数仪分为明场款（激发光为白光）和荧光款（不同颜色的激发光），其中明场包括非台盼蓝染色和台盼蓝染色，如果您平时只关注细胞浓度，这时选一款明场计数仪即可满足需求。那如果细胞浓度和细胞活率都关注，我们就需要考虑用经典台盼蓝染色还是AO（吖啶橙）/PI（碘化丙啶）双荧光染色分析。

台盼蓝和荧光染色比较

_	台盼蓝染色	AO/PI荧光染色
原理	细胞膜的通透性（非特异性染色）	核酸染色（特异性染色）
识别区分	活细胞：不染色死细胞：蓝色	活细胞：绿荧光死细胞：红荧光
适用范围	常规传代培养细胞	细胞系、原代细胞、免疫细胞等

当然，除了台盼蓝和AO/PI双荧光染色之外，还可以通过AO/DAPI染色，DAPI染色可以标记所有细胞核，可能在特定条件下染色死细胞。PI相比DAPI染死细胞则更为专一，用于标记失去膜完整性的死细胞。针对细菌的活率分析，还可以通过SYTO-9/PI染色，SYTO-9是一种能够透过细胞膜的绿色荧光核酸染料，可用于细菌的RNA和DNA染色。

2、测试数据的可靠性

在完成第一步选择后，接下来需要选择一个检测数据可靠的计数仪，无论它功能多么强大，数据可靠性是关键的，它主要体现在测试数据的准确性和稳定性。

其中准确性是测试值与真实值之间的差异，我们一方面可以通过与人工血球计数对比，相同的一管细胞样本，通常要求计数仪与人工之间的计数误差在10%以内；另一方面可以用标准品（不同浓度、直径和活率的标准品）进行验证；要求更高的用户会请第三方计量公司进行再次计量验证，最后结合自己的细胞进行方法学验证，通过以上多重验证，最后确定仪器的准确性。

其次，稳定性通常我们可以对同一个样品进行几组平行测试，或者对同一个高浓度样品做梯度稀释分析线性关系，这里面有一个重要的参数CV值（变异系数），一个可靠的计数仪，在合适的浓度范围内，通常CV值＜5%。

决定一个计数仪数据可靠性，主要有以下两个方面：

硬件包括光路系统、成像系统，其中成像的像素决定图片的清晰度，从而影响到识别结果；配置越高，成像越清晰；其次是自动化过程，这里面包括进样、对焦、曝光等参数，全自动过程能减少人为操作带来的误差，从而提高检测数据的稳定性，

软件算法在获得一张高质量图片之后，要对其进行算法识别分析，目前主要基于两种算法，一种是基于灰度值（普通算法），另外一种是基于深度学习人工智能算法（AI算法），这种先进算法相对于普通算法，能够对聚团细胞精准分割，对不规则细胞精准识别，对含有细胞碎片、杂质等复杂样本精确计数，这种算法能够实现不同领域、不用应用场景的计数分析。萌薇生物也是国内早期将AI技术应用在细胞计数领域并进行仪器开发的厂家。

3、检测效率

传统的血球计数法能够不断被智能细胞计数仪替代，其中检测效率是一个非常大的因素，如果您每天检测的细胞样本量多，检测效率相当关键，一个优秀的计数仪，不仅准和稳，快也很重要。检测效率主要包括以下两点：

单个样品检测时间：通常检测一个样品，人工计数时间在3-5分钟，计数仪在10秒到2分钟时间不等，产生差异的原因主要是仪器的自动化程度，尤其是手动进样和手动调焦会直接影响到计数的效率，其次是算法分析的时间也有差异，例如先进的AI算法将直接缩短处理图片的时间，这也是为什么萌薇计数仪实现测试分析速度快的重要原因。

计数板通量：一块血球计数板有两个加样孔槽，市面上绝大数计数仪也是采用两个通量，当我们样本量比较多时，就需要更高通量的计数板，一次性可以同时测多少样品，这也是决定效率的一个因素。

4、其他因素

除了以上三点以外，还有一些其他因素也得考虑：

机型--分体机还是一体机，主要根据细胞房空间大小来选择，分体机需要连接电脑，一体机则包含显示屏，可直接操作，相对分体机价格要高一些，但使用起来简单方便。

软件分析功能--一台优秀的计数仪在完成基本的参数（细胞浓度、活率、直径、圆度、聚团率）分析功能之后，还要具备对测试数据的整理和分析，包括直径分布图、测试数据再分析、数据对比分析（CV值计算）、增殖曲线等分析功能；满足JPG、EXCEL、PDF等多种格式的数据输出方式，不仅能通过U盘输出还可以通过服务器输出；数据的备份和恢复也是必要的，保障用户的数据；除此之外，稀释计算器和传代计算器会让您的实验变得更加简单。

性价比--硬件配置高，软件分析功能强大，技术参数优秀的计数仪往往相比于低配置的参数价格高一些，但不能一味追求低价，让数据准确性和精确性没了保障，甚至反而影响我们的实验进度，最后可能面临重新选择。所有小薇经常在一些用户细胞房会发现在吃灰的低端计数仪，面对这些价格低的仪器选择要慎重！

服务--这里包括售前售后服务、试用培训、技术支持，3Q验证服务，以及仪器的质保期。

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