符合FDA法规要求的防晒剂HPLC 分析方法

简介：长时间暴露在来自太阳或者日 晒机器床的紫外线（UV）辐射 下，会对皮肤细胞的 DNA 造成 伤害，引起基因突变，从而导致皮肤癌，在美国每年有 350 万这样的病例，大约 11500 人死亡。UV 分为三种：UVC、 UVB 和 UVA。在这三者中，UVC 的波长最短，也是最危险的。幸运的是，UVC 被大 气中的臭氧层吸收。UVB 的波长较短，能够穿透皮肤的外层。UVA 波长较长，能 够穿透进入深层皮肤，从而引起皮肤晒斑和过早老化，这两种类型的 UV 都能够引起皮 肤基因突变，从而导致皮肤癌。

可以通过避免长时间暴露在 UV 光源下，或者在皮肤暴 露于 UV 光源之前或过程中使用防晒霜的方法来防止皮 肤癌。防晒霜之所以能够保护皮肤，是由于其中包含一 些化合物，这些化合物可以化学吸附或者物理方式阻隔 UVA 和 UVB。2012 年夏天，美国出台了新的法规，阐 明了防晒霜的生产企业使用“broad spectrum”的术语。 新法规规定，只有防晒指数（SPF）值不少于 15,提供充 分的 UVA/UVB 防护的防晒产品，才能在其标签上标明 “broad spectrum”。SPF15 是指，假设 UV 的强度固 定，使用防晒产品来防护 UVB，使用者暴露于 UV 下不 被灼伤的时间比未使用防晒产品者不被灼伤的时间长 15 倍。

本应用文献提供了同时分析五种常用防晒剂的方法，从 而帮助确保防晒产品具有足够防晒级别，安全性，并且 符合新法规要求。本应用文献对标称 SPF30, 50 和 100  的三种防晒霜进行了分析，测定了其中各种防晒剂类化 合物的含量。

试验 分别称取一定量的纯物质于 20 mL 的容量瓶中，制备 5 mg/mL 的欧托奎雷、辛水杨酯、甲基水杨醇和 2 mg/mL 的阿伏苯宗及二甲苯酮的储备液。首先加入 10mL 异丙 醇，涡旋 1 min，，然后超声 10 min。冷却至室温，乙腈 定容至刻度。移取标准储备溶液 0.5 mL 于 10 mL 的容 量瓶中，乙腈定容至刻度，制备工作标准溶液。工作标 准溶液连续六次进样计算重复性。

防晒乳液样品制备：分别称取 0.5 g 30 SPF、50 SPF、 100 SPF 的防晒乳液样品置于三个 10 mL 的容量瓶中，加入 5 mL 异丙醇，涡旋 1 min 后，超声 10 min，待溶液冷却至室温，乙 腈定容至刻度。样品溶液 5000 RPM 离心 10 min，分别移取 30 SPF，50 SPF，100 SPF 样品上层溶液 3 mL、2 mL、1.5 mL 于不同的 50 mL 容量瓶中，乙腈定容至刻度。进样之前， 样品经 0.2 μm 的尼龙膜过滤。

结果与讨论 本文献使用珀金埃尔默 Brownlee™ C-18 分析色谱柱进行分 离，5 μm，150 x 4.6 mm。运行时间约 8 min，最佳的流速为 1.2 mL/min，且压力适当，背压为 2000 psi（138 bar）。所有 被分析的五个化合物得到了很好的分离。重复性结果良好， RSD%范围为 0.7-1.0。根据三种防晒霜的标称值计算，30 SPF，50 SPF，100 SPF 的回收率分别为 83%，78%和 85%。 工作溶液的色谱图见图 1 所示，30 SPF，100 SPF 三个样品 的色谱图分别见图 2，3。方法性能和防晒霜样品测定结果见 表 2 所示。不同防晒剂最大允许量如表 3 所示。

结论 在世界范围内，皮肤癌的发病率持续增加，达到了流行 病的程度。使用防晒霜来防止该类疾病持续增长，由此 防晒霜的功效和安全越来越被关注。本应用文献提供了 6 min 内完成五种主要防晒剂的分析方法。方法性能突 出，精密度的范围为 0.7 %-1.2 % RSD。防晒霜中该五 种防晒剂化合物分析结果在美国，英国，日本和巴西规 定的最大允许含量范围之内。该分析利用可靠的 PerkinElmer’s FX 15 系统，使用 Agilent’s® EZChrom  Elite™色谱数据系统进行控制来完成。