试剂简介
Acti-stain 670 Phalloidin是由西安强化生物科技开发的红色荧光探针。
其核心成分 鬼笔环肽(Phalloidin) 是一种从毒蘑菇鬼笔鹅膏(Amanitaphalloides)中提取的七肽毒素,能特异性结合聚合态肌动蛋白(F-actin),但不结合单体肌动蛋白(G-actin)。
该探针主要用于细胞骨架的动态结构研究,适用于固定细胞和组织切片的荧光染色。
实验方法与操作步骤
样品准备
<固定细胞>:使用3.7%多聚甲醛固定细胞(避免甲醇破坏F-actin结构),0.5% Triton X-100通透5分钟。
<活细胞>:需结合低毒性透膜剂(如SIR-Actin试剂盒)。
染色液配制
取14 µM原液,用甲醇溶解后稀释至100 nM工作液(PBS或细胞培养基稀释)。
孵育与清洗
每张载玻片滴加200 µl工作液,室温避光孵育30分钟。
PBS清洗3次(每次30秒),去除未结合探针。
复染与成像
<核染色>:可选DAPI(100 nM,30秒)。
<封片>:抗淬灭封片剂封固,4℃避光保存24小时内成像
规格信息
外观:浅蓝色固体
纯度:>99%
分子量:2011
保存:冻干粉4℃干燥保存1年;储存液-20℃避光保存半年;
重溶方法:使用前简单离心使得产品都降至管底,加入500µl 甲醇充分溶解后配置成14µM储存液。建议按照10×50µl分装,-20℃避光保存,稳定保存6个月。
运输方式:冰袋运输
生产厂商:西安强化生物科技
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本试剂用于科研领域,其他用途概不适用!
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