手机版
化工仪器网手机版
化工仪器网小程序
官方微信
公众号：chem17
扫码关注视频号
紫外可见分光光度计的定量分析方法是基于朗伯-比尔定律（A=εbc）展开的，通过测定溶液对特定波长光的吸光度来计算物质浓度，其核心方法及要点如下：
一、标准曲线法（常用方法）
操作步骤
配制系列标准溶液（浓度梯度已知）。
在选定波长下，依次测定各标准溶液的吸光度。
以吸光度为纵坐标、浓度为横坐标绘制标准曲线。
测量待测样品吸光度，通过曲线查得浓度。
适用场景
适用于样品与标准物质化学性质相似、无显著干扰的情况。
需保证标准曲线线性良好（R²≥0.999），浓度范围覆盖待测值。
注意事项
需定期校准仪器，确保吸光度测量精度。
避免标准溶液浓度过高导致偏离线性范围。
二、标准加入法（克服基体干扰）
操作步骤
测量待测样品原液的吸光度（A₀）。
向原液中加入不同体积的标准溶液，配制系列加标样品，分别测量吸光度（A₁,A₂,...）。
以加入标准溶液浓度为横坐标、吸光度为纵坐标绘制工作曲线，外推至横轴交点即为待测物浓度。
适用场景
适用于样品基体复杂、背景吸收显著的情况。
可有效消除基体效应对测定的干扰。
注意事项
需保证加标体积远小于样品体积（通常≤10%）。
外推法依赖线性假设，需验证工作曲线线性。
三、吸收系数法（直接计算法）
操作步骤
测定待测溶液在特定波长下的吸光度（A）。
已知物质的摩尔吸光系数（ε）和液层厚度（b），通过公式c=A/(εb)计算浓度。
适用场景
适用于ε值准确已知的纯物质分析。
无需绘制标准曲线，操作简便快捷。
注意事项
ε值受温度、溶剂、pH等因素影响，需严格控制实验条件。
仅适用于单一组分或组分间无光谱干扰的情况。
四、多组分同时测定法（复杂体系分析）
双波长法
选择两个波长（λ₁、λ₂），使其中一物质在λ₁有吸收、另一物质在λ₂有吸收。
通过联立方程消除干扰组分影响，分别计算各组分浓度。
三波长法
适用于严重重叠光谱，通过三个波长下的吸光度值建立方程组求解。
导数光谱法
利用吸光度对波长的导数（如一阶、二阶导数）消除背景干扰，提高分辨率。
五、方法选择依据
样品特性
简单体系：优先选用标准曲线法或吸收系数法。
复杂基体：采用标准加入法或多组分分析法。
分析目的
快速筛查：吸收系数法更高效。
精准定量：标准曲线法或标准加入法更可靠。
仪器条件
需保证仪器波长准确度（±0.3nm）、吸光度精度（±0.002Abs）。
比色皿需匹配波长范围（石英用于紫外区，玻璃用于可见区）。
免责声明
- 凡本网注明“来源：化工仪器网”的所有作品，均为浙江兴旺宝明通网络有限公司-化工仪器网合法拥有版权或有权使用的作品，未经本网授权不得转载、摘编或利用其它方式使用上述作品。已经本网授权使用作品的，应在授权范围内使用，并注明“来源：化工仪器网”。违反上述声明者，本网将追究其相关法律责任。
- 本网转载并注明自其他来源（非化工仪器网）的作品，目的在于传递更多信息，并不代表本网赞同其观点和对其真实性负责，不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时，必须保留本网注明的作品第一来源，并自负版权等法律责任。
- 如涉及作品内容、版权等问题，请在作品发表之日起一周内与本网联系，否则视为放弃相关权利。
采购中心
