基因敲除细胞系构建服务--助力科研技术创新

上海雅吉生物公司代理销售ATCC来源，sciencell来源，上海细胞库来源等细胞销售，另我公司有自建细胞库，生产培养各类细胞系，采用灌注法制备各种原代细胞。

基因敲除细胞系构建服务：助力精准探索与技术创新 

随着基因组学和分子生物学的快速发展，基因敲除技术已成为探索基因功能、研究疾病机制和开发新药的重要工具。基因敲除细胞系作为该技术的核心产品之一，广泛应用于学术研究、药物筛选及疾病模型的构建等领域。今天就为大家分享一下基因敲除细胞系构建流程。

基因敲除常用于研究基因在细胞功能中的作用。下面是常用的基因敲除细胞系构建方法和步骤：

 插入突变（Knock-in）：通过转基因技术将外源DNA片段插入至目标基因位点，使目标基因发生突变而实现基因敲除的目的。这个过程通常需要克隆目标基因的编码序列，并将突变（例如终止密码子）或荧光标记等片段插入其中。

 CRISPR/Cas9敲除：利用CRISPR/Cas9系统，设计合成质粒（sgRNA和Cas9蛋白），导入靶向基因组并诱导DNA双链断裂。通过细胞自我修复机制（非同源末端连接或同源重组），实现对靶向基因的敲除。

基因敲除细胞株核心优势

1 高效基因编辑：双sgRNA策略，敲除效率>90%

2多癌种覆盖：18种标准化肿瘤细胞模型（下表）

3 严格质控：STR鉴定、支原体检测、测序验证

 4快速交付：现货细胞5个工作日内发货，定制服务6-8周

技术参数

参数规格

验证方法Sanger测序 + Western Blot

敲除效率>90%（测序验证）

脱靶率<0.1%（全基因组脱靶分析）

传代稳定性≥15代（基因型稳定）

基因敲除细胞株实验注意事项

1.细胞选择：优先使用 肿瘤细胞系（如HEK293、HepG2），永生细胞系可能因高拷贝数导致敲除困难。

2.验证方法：基因组水平：PCR扩增靶位点+Sanger测序。

3.蛋白水平：Western Blot检测SDK1蛋白是否缺失（需选择大片段敲除避免假阴性）。支原体检测：避免污染影响实验结果。