熟悉荧光显微镜的工作原理

荧光显微镜是一种利用荧光现象进行观察的特殊光学显微镜，在生命科学、医学、材料科学等领域发挥着重要作用。

荧光显微镜利用被称为荧光的自然现象。在荧光显微镜下，通过激发样品内部的某些细胞结构或者分子等，使他们进入到激发态，当它们回到基态时，会释放出可见光区的光，通过放大并检测此荧光来生成图像。因为荧光只从被激发的分子发射出来，所以它可以提供高度选择性的成像能力。

工作原理：

1、激发荧光：使用特定波长的光照射样本，样本中的荧光物质吸收激发光能量后跃迁至高能级状态。

2、发射荧光：处于激发态的荧光物质不稳定，返回基态时发射出波长更长的荧光。

3、滤光成像：通过激发滤光片确保特定波长激发光照射样本，阻挡滤光片仅允许荧光信号到达观察者，配合暗视野背景形成高对比度图像。

荧光显微镜是免疫荧光细胞化学的基本工具。它是由光源、滤板系统和光学系统等主要部件组成。是利用一定波长的光激发标本发射荧光，通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像。

功能：

1、荧光标记观察：对细胞内特定分子进行荧光标记，实时监测其动态变化。

2、高对比度成像：暗视野背景与荧光信号形成强反差，可分辨微弱荧光信号。