ECL化学发光底物（高灵敏度）的操作流程

ECL化学化学发光底物（超敏）可为使用辣根过氧化物酶（HRP）偶联物的免疫印迹实验提供明亮的信号和低皮克级检测灵敏度。 该ECL底物能够兼容各种膜、封闭液和宽范围抗体稀释液，以出色性能、通用性和高性价比，满足用户的免疫印迹应用需求。

操作步骤：

1、执行常规SDS-PAGE、转模和Western Blot步骤。 注意用HRP标记lgG或用一抗-链亲和素-生物素-HRP夹法。

2、Western Blot最后一次洗模的同时配置发光工作液：分别取等体积的A液和B液，放入干净容器中混合（注意吸取A液和B液的吸头一定要分开，避免试剂污染）。 建议立即使用工作液，室温放置数小时后仍可使用但灵敏度有所降低。

3、Western Blot最后一次洗膜后，用镊子将膜取出，用滤纸吸去多余的洗涤液（切勿接触膜的蛋白面），然后置于一洁净保鲜膜上或塑料容器内。

4、根据膜的大小按比例滴加配置好的ECL工作液到膜上，确保工作液均匀覆盖在膜上，放置1-3分钟。

5、取膜，用滤纸吸去多余的液体，将膜放在两篇保鲜膜中间，随后进行压片检测或化学发光成像仪检测。

6、压片检测：将膜固定于X光胶片暗盒内（注意蛋白面向上）。 暗房内压X光胶片，分别曝光不同的时间，如数秒到数分钟，显影冲洗。

7、化学发光成像仪检测：将膜放置到化学发光成像仪内，参考仪器说明书进行检测。