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冻存液用于在低温环境下保护细胞，减少冰晶形成，防止细胞膜和结构的损伤。其具体成分通常包括以下几类：
冷冻保护剂：
二甲基亚砜(DMSO)：常用的冷冻保护剂，浓度通常在5%到10%之间。它可以降低冰点，减少冰晶形成，并渗透细胞膜，平衡细胞内外的渗透压。但高浓度可能对某些细胞有毒性，需优化浓度或结合其他保护剂使用。
甘油：另一种常用的冷冻保护剂，浓度一般在5%到20%之间，常用于胚胎细胞或干细胞冻存。其作用与DMSO类似，但渗透速度较慢。
基础培养基：
常用的培养基有DMEM、RPMI-1640、MEM等，用于维持细胞的pH和渗透压，提供基本营养。
血清或替代物：
胎牛血清(FBS)：浓度通常在10%到20%之间，含有丰富的蛋白质和生长因子，为细胞提供营养和保护。
无血清替代物：如含白蛋白、脂质和生长因子的商业冻存液，适用于需要避免血清成分干扰的实验。
附加成分(可选)：
抗生素：如青霉素-链霉素，用于防止细菌污染。
糖类：如葡萄糖、海藻糖，可以辅助稳定细胞膜，减少冷冻过程中的渗透压变化对细胞的影响。
抗凝剂：如肝素，可以防止细胞在冻存过程中发生凝集。
缓冲剂：如HEPES，用于维持冻存液的pH稳定，防止冷冻过程中pH值的剧烈变化。
蛋白质稳定剂：如白蛋白，可以防止蛋白质的变性和聚集。
在实际应用中，冻存液的配方会根据细胞类型、实验需求以及后续使用目的进行调整。例如，对于特别珍贵的细胞系，可能会采用高比例的血清(如90%FBS、10%DMSO)以提供更好的保护。而一些商业化的无血清细胞冻存液则不含血清和动物来源的蛋白，适合无血清培养细胞和蛋白表达细胞，能减少病毒、霉菌和支原体等的污染风险。
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