CST抗体说明书

一、产品概述

CST抗体以高特异性、灵敏度和稳定性著称，广泛应用于蛋白质功能研究、信号通路分析及疾病机制探索。其核心产品线包括XP®系列兔单克隆抗体（采用XMT®技术开发）和经严格验证的多克隆抗体，覆盖肿瘤标志物、磷酸化修饰蛋白、细胞周期调控因子等靶点。

二、产品组成与规格

1. 抗体形式

• 液体抗体：含50%甘油缓冲液（避免冻融），直接使用无需复溶。

• 冻干抗体：需用推荐缓冲液（如无菌水或含BSA的PBS）复溶。

2. 包装规格

• 常见规格：20μL、100μL、200μL、1mL。

• 配套试剂：推荐使用CST推荐的封闭液、二抗及显色试剂（如SignalStain®系列）。

三、储存条件与有效期

1. 储存温度

• 未开封抗体：-20℃保存（含甘油，保持液态）；偶联抗体（如HRP标记）需4℃保存。

• 开封后抗体：建议分装后-20℃保存，避免反复冻融（注：CST不建议分装，若必须分装需确保无菌操作）。

2. 有效期

• 单组分抗体：以管身“Ref:”后的灌装日期为起始，通常为2年。

• 试剂盒：以条形码标签日期为准，冻干细胞因子产品需在购买后12个月内使用。

四、使用方法

1. 实验前准备

• 查阅说明书：确认抗体的应用范围（如WB、IHC、IF）、推荐稀释比例及种属反应性（如人、小鼠、大鼠）。

• 样本处理：

• 细胞裂解液：推荐使用CST专用裂解缓冲液（如RIPA Buffer），加入蛋白酶/磷酸酶抑制剂。

• 组织样本：福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）样本需按说明书进行抗原修复。

2. 推荐操作流程

• Western Blot（WB）

1. 上样量：20-30μg总蛋白，使用12% SDS-PAGE胶分离。

2. 转膜：湿转法，推荐0.2μm硝酸纤维素膜（NC膜）。

3. 封闭：5%脱脂牛奶（货号#9999）室温封闭1小时。

4. 一抗孵育：4℃过夜（磷酸化抗体需延长反应时间）。

5. 二抗：抗兔/鼠HRP标记二抗（货号#7074/#7076），室温孵育1小时。

• 免疫组化（IHC）

1. 抗原修复：推荐柠檬酸缓冲液（pH6.0）高压修复。

2. 阻断：3% H₂O₂处理10分钟，5% BSA封闭。

3. 显色：DAB或SignalStain®显色试剂。

五、注意事项

1. 购买渠道

• CST代理——天津益元利康生物科技有限公司，提供CST抗体、试剂盒等，确保正品及售后支持。

2. 抗体分装禁忌

• 分装可能导致浓度不均、污染或活性损失，CST不承担分装后质量问题。

3. 实验优化建议

• 磷酸化抗体：需严格验证样本刺激条件（如EGF处理15分钟激活Akt）。

• 多色流式：搭配CompBeads微球调节荧光补偿，避免通道干扰。

4. 常见问题排查

• 无信号：检查样本中靶蛋白表达水平（参考UniProt或BioGPS数据库），确认抗体稀释比例及孵育时间。

• 高背景：缩短封闭时间，更换封闭液（如BSA替代脱脂牛奶）。

附录：推荐配套试剂

注：更多产品信息请联系天津益元利康生物科技有限公司。