如何选择最佳的 qPCR 探针化学试剂

让应用程序成为您在 LNA、MGB 和 BHQplus 之间做出决定的指南 

qPCR 探针的多种不同填料为科学家在检测开发过程中提供了丰富的选择。锁定核酸 （LNA）、小沟结合物 （MGB） 和 BHQplus™ 探针均可增强双链体稳定性，这有助于您的检测获得高信噪比，同时保持寡核苷酸长度相当紧凑。它们还能够更好地适应具有挑战性的靶标，如富含 A-T 的序列。但每种探针类型的化学性质意味着您将获得最佳的检测性能 – 信噪比、检测限 （LOD） 等。– 当您将探头类型与应用程序匹配时。

MGB 探针适用于检测 SNP 和困难的基因表达靶标

什么是 MGB 探头？

MGB 探针的长度通常为 8-30 个碱基，5' 端有一个荧光团，3' 端有一个淬灭基团。3' 末端也连接到一个化学部分 - MGB - 该化学部分与双链 DNA 的小沟非共价结合。

MGB 探针如何工作？ 使用 MGB 探针时，MGB 与探针-靶结构的小沟的结合增强了双链体的稳定性。

图 1.MGB 探针是双标记的 5′ 水解探针，由 5′ 荧光报告染料和 3′ Eclipse 暗淬灭基团 （EDQ） 组成，与 MGB 部分偶联。

MGB 探针适合哪些应用？什么时候应该使用 MGB 探头？

由于 MGB 附着在寡核苷酸的末端，因此易于设计 - 只需使用与目标区域互补的寡核苷酸序列即可。这使得 MGB 探针成为检测 SNP 和困难的基因表达靶标（例如富含 A-T 含量的序列）的理想选择。

然而，虽然设计可能很简单，但熔融温度 （Tm） 无法进行微调。

LNA 探针是需要高特异性和灵敏度的应用的理想选择

什么是 LNA？

LNA，也称为桥式核酸，是经过修饰的碱基，其中糖的 2' 氧和 4' 碳与亚甲基桥共价连接。

对用于 SYBR Green 检测的 LNA 增强引物感兴趣？除了提供 LNA 探针外，Biosearch Technologies 还合成具有内部 LNA 修饰的定制寡核苷酸。

BHQplus 探针是需要高特异性和灵敏度的应用的替代选择

什么是 BHQplus 探头？

与 LNA 探针一样，BHQplus 探针利用化学修饰的单体来增强探针-靶标双链体的稳定性和特异性。

然而，BHQplus 探针中使用的专有化学成分与 LNA 不同，这为科学家提供了另一种探针化学选择。

BHQplus 探头适合哪些应用？什么时候应该使用 BHQplus 探头？

与 LNA 探针一样，BHQplus 探针非常适合需要高灵敏度和特异性的应用。它们为 LNA 探头技术提供了一种更易于设计且价格更具竞争力的替代方案，当您不需要微调探头性能时，它是一个不错的选择。

在探针化学的选择中进行选择

虽然我们已经强调了使每种探针化学成分大放异彩的具体优势，但其中有很多重叠，您可能希望在检测开发过程中试用每种类型的探针。