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synvolux:SAINT试剂常见问题

来源:上海牧荣生物科技有限公司   2025年03月28日 11:38  

SAINT 试剂的储存

我们所有的 SAINT 试剂均作为即用型转染试剂在室温下运输。到达后,应储存在 4-7°C 下(不要冷冻)。稳定性研究表明,SAINT 试剂在开封后至少可稳定一年。


我将 SAINT 试剂存放在冰箱中。我还能使用它吗?

是的!解冻后,SAINT 试剂可能会出现浑浊和更粘稠。使用前,请确保涡旋充分以获得均匀的分散,或者更好的是,声音达到透明度。混合物不*全再溶解会导致工作浓度降低。



我可以在有血清的情况下使用 SAINT 吗?

是的!在血清存在的情况下,SAINT 转染不会受到抑制。然而,由于 siRNA 极易被血清中存在的 RNA 酶降解,因此可以使用使用 SAINT-sRNA 的替代无血清 siRNA 转染方案。


抗生素会干扰我的转染吗?

不!抗生素对转染效率没有影响。


哪些参数会影响转染结果?

通常,以下参数会影响转染结果:

  • DNA、RNA、寡核苷酸或蛋白质的纯度和浓度

  • 载体序列(启动子、poly(A)-tail、密码子使用等)

  • 添加的 SAINT/DNA 复合物量

  • 靶细胞(细胞类型、细胞周期、传代数等)

  • 蛋白质表达(时间依赖性表达水平、表达蛋白质的毒性等)

与大多数其他转染试剂和递送系统一样,使用高度纯化的 DNA、RNA 或蛋白质/肽可获得最佳结果。

细胞的“转染性”变化很大。例如,非分裂和非贴壁细胞通常难以转染,而其他细胞类型可能很容易转染,转染效率在 80% 到 100% 之间。此外,某些转染试剂可能比其他试剂对某些细胞效果更好,而某些试剂可能对特定细胞类型有毒。因此,我们建议花一些时间使用报告基因构建体(如 GFP)优化特定细胞类型的转染条件。


为什么我使用双倍量的 SAINT 时,我的转染效率没有翻倍?

SAINT-DNA/sRNA/mRNA 中的阳离子组分与带负电荷的 DNA/siRNA/mRNA 之间的电荷比对于高效转染非常重要。作为起点,我们建议使用 1:20 比例的 DNA/RNA:SAINT 试剂 (w:v)(例如,对于 12 孔规格,0.5 ug DNA:10 ul SAINT-DNA)。为了在您的实验中获得最佳转染结果,值得优化 DNA/RNA 剂量(例如,对于 12 孔规格,0.25 ug – 1 ug DNA)和 DNA/RNA:SAINT 试剂比例(例如,对于 12 孔规格,1:10 – 1:40)。


我应该使用哪种 SAINT 试剂进行 DNA、RNA 和/或蛋白质的共转染?

我们的 SAINT 试剂针对 DNA (SAINT-DNA)、siRNA (SAINT-sRNA)、mRNA (SAINT-mRNA) 和蛋白质 (SAINT-protein) 的转染进行了优化,但它们都可以在一定程度上递送其他分子。根据您的实验要求,您可以将一种 SAINT 试剂用于两个不同的分子,或者每个分子使用特定的 SAINT 试剂。


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