在分子生物学研究中,精准检测大肠杆菌(E.coli)残留RNA时,样本中混杂的DNA可能干扰实验结果。针对这一需求,由柏莱源(天津)生物科技有限公司代理的谱新生物Hillgene推出的E.coli残留总RNA样本前处理试剂盒(Cat. No. HG-CL300),通过高效去除DNA污染,为后续RNA检测提供纯净样本。本文将详细介绍其原理、操作步骤及核心优势,助力科研人员提升实验效率。
一、产品简介:为何需要去除E.coli残留DNA?
在基因表达分析、RNA测序或病原体检测等实验中,残留的宿主DNA可能导致假阳性结果或数据偏差。本试剂盒专为去除E.coli样本中的DNA污染设计,通过DNase I酶切技术,结合RNase Inhibitor保护RNA完整性,确保检测结果高度可靠。
适用场景:配套E.coli残留总RNA检测试剂盒(HG-ER001),适用于药物研发、细胞治疗产品质控等科研领域。
核心优势:
高效去DNA:DNase I快速消化DNA,37℃孵育60分钟即可完成。
RNA保护:添加RNase Inhibitor,防止RNA降解。
操作简便:预混反应体系,20分钟完成灭活与保存。
二、试剂盒组成与储存条件
每盒包含100次反应所需组分(详见表1):
组分 | 体积 | 存储条件 |
---|---|---|
10X Reaction Buffer | 220μL | -20℃ |
DNase I | 110μL | -20℃ |
RNase Inhibitor | 55μL | -20℃ |
无酶水 | 2×1mL | -20℃ |
有效期:-20℃保存可达18个月,避免反复冻融。
三、实验步骤详解(附操作流程图)
1. 反应体系配置
按表2配制20μL反应液:
组分 | 用量(μL) |
---|---|
DNase I | 1 |
10X Reaction Buffer with MgCl2 | 2 |
RNase Inhibitor | 0.5 |
无酶去离子水 | 12.5 |
供试品 | 4 |
2. 酶切与灭活流程
步骤1:混匀反应液,离心后37℃孵育60分钟。
步骤2:65℃加热10分钟灭活DNase I,2-8℃暂存样本。
四、关键注意事项
分区操作:阳性与阴性样本需在不同区域处理,避免交叉污染。
低温操作:试剂融化后置于冰上使用,确保酶活性。
耗材更换:每一步骤更换吸头,减少气溶胶污染风险。
配套使用:建议搭配原厂检测试剂盒(HG-ER001)以保证最佳效果。
五、常见问题解答(FAQ)
Q1:能否用于临床诊断?
本试剂盒仅限科研用途,不适用于临床检测。
Q2:DNase I灭活不彻i底怎么办?
严格按65℃加热10分钟操作,瞬时离心确保彻i底灭活。
Q3:样本处理后的保存时间?
灭活后样本建议2-8℃保存不超过24小时,避免RNA降解。
六、为何选择Hillgene?
高稳定性:通过冻融循环验证,无需分装。
专业支持:提供技术咨询与定制化解决方案。
严控质控:每批次试剂均经过严格质检,确保实验可重复性。
七、结语
E.coli残留总RNA样本前处理试剂盒(HG-CL300)凭借其高效去DNA能力与操作便捷性,已成为分子生物学研究的优选工具。无论是基因治疗产品开发,还是病原体RNA检测,均能显著提升实验精准度。立即联系柏莱源生物获取更多产品信息!
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柏莱源(天津)生物科技有限公司的优势:
现货供应:公司库存充足,可快速发货,减少用户等待时间。
效期保障:严格把控产品质量,确保试剂效期新鲜,保障实验结果的可靠性。
专业技术支持:提供详细的实验方案和技术指导,帮助用户优化实验条件,提高实验成功率。
定制化服务:根据用户需求,提供个性化的产品和服务解决方案。
售后保障:完善的售后服务体系,及时解决用户在使用过程中遇到的问题。
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