蛋白印迹仪的使用规范与注意事项

来源：重庆斯成锐科技有限公司 2025年03月24日 11:29

　　蛋白印迹仪(Western Blot System)是一种用于检测和分析特定蛋白质的实验设备。其原理包括聚丙烯酰胺凝胶电泳(分离蛋白质)、转膜(将蛋白质转移到固相载体，如NC膜或PVDF膜)、抗体孵育(特异性抗体与目标蛋白结合)、显色反应(标记的二抗与底物反应，显示目标蛋白)。

　　蛋白印迹仪广泛应用于生物医学研究(如蛋白质表达分析、细胞信号通路研究)、临床诊断(如HIV感染确认、自身免疫性疾病检测)、药物研发(如生物标志物发现、蛋白质相互作用研究)等领域。其优势在于高灵敏度和特异性，能够定量和定性分析蛋白质。

　　使用规范与注意事项：

　　1、实验准备：

　　样本需充分裂解，定量后上样(避免过载导致条带模糊)。

　　预制胶需平衡至室温，避免冷凝水影响电泳。

　　2、转膜优化：

　　PVDF膜需甲醇激活，NC膜需缓冲液浸润。

　　转膜时间根据蛋白分子量调整(如100kDa蛋白需1.5小时)。

　　3、抗体孵育：

　　一抗浓度需预实验确定，4℃过夜孵育效果佳。

　　二抗需避光保存，现用现配。

　　4、设备维护：

　　定期清洁电泳槽和转印电极，防止蛋白残留。

　　校准成像系统的光强和曝光时间，确保定量准确性。

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