CY7.5-N3 是一种带有叠氮基(-N3)的荧光染料,常用于点击化学反应。在制作过程中,需注意以下几点:首先,反应环境应避免还原剂,因为叠氮基易被还原失活。其次,反应温度一般控制在室温至37°C,避免高温导致染料分解。此外,反应溶液的pH值应严格控制在6.5-7.5之间,过高或过低的pH值均会影响叠氮基的活性。在使用时,CY7.5-N3 可通过与炔基(-C≡C-)修饰的生物分子进行点击化学反应。例如,与蛋白质上的炔基侧链反应。标记完成后,需通过凝胶过滤或透析等方法去除未反应的染料。标记后的生物分子可用于荧光成像、流式细胞术等检测,但需注意避光保存,以防止荧光淬灭。
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