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重组人BMP2的制备方法通常包括以下步骤

来源:赛尔瑞成(北京)生命科学技术有限公司   2025年03月12日 14:37  
  重组人BMP2的制备方法通常包括以下步骤:
  1.基因工程手段:首先,将编码BMP-2的基因插入到表达载体中,然后将其转入宿主细胞,如大肠杆菌,使宿主细胞能够表达BMP-2。
  2.蛋白表达:在适宜的培养条件下,使转入基因的细胞进行发酵,大规模生产BMP-2蛋白。
  3.细胞破碎与包涵体提取:通过高压匀浆等方法破坏细胞壁,收集并漂洗包含BMP-2的包涵体。
  4.变性与复性:使用尿素等变性剂使蛋白复性,通过控制pH值和尿素浓度,以及应用超滤膜技术,使变性的BMP-2蛋白重新折叠恢复活性。
  5.纯化:采用离子交换层析、亲和层析等方法,去除杂质,获得高纯度的rhBMP-2。
  6.冷冻干燥:最后将纯化后的蛋白进行冷冻干燥,制成最终的成品。
  重组人BMP2的存放要求对于保持其活性和稳定性至关重要。以下是具体存放要求:
  一、温度控制
  冷冻保存:应存放在冷冻环境中,一般推荐的温度为-20℃至-80℃。这样的低温环境可以有效地减缓蛋白质的降解速率,保持其活性。
  避免反复冻融:为了保持BMP-2的活性,应避免对其进行反复冻融。反复冻融会导致蛋白质结构发生变化,从而影响其生物活性。
  二、容器与包装
  无菌容器:BMP-2应存放在无菌容器中,以避免细菌污染。无菌容器可以是玻璃瓶或塑料瓶,但必须经过严格的灭菌处理。
  密封包装:容器中的BMP-2应密封包装,以防止外界空气和水分对其产生影响。
  三、其他注意事项
  避光保存:虽然直接光照对BMP-2的影响可能不是主要因素,但为了避免潜在的风险,建议将其存放在避光的地方。
  远离有害物质:BMP-2应远离有害物质,如强酸、强碱、有机溶剂等,这些物质可能会与其发生反应,导致蛋白质变性或失活。
  标注与记录:在存放BMP-2的容器上应清晰标注其名称、浓度、生产日期、有效期等信息,以便于管理和使用。同时,应建立相应的库存记录,跟踪其使用情况。
 

 

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