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IAC-SEP 维生素B12免疫亲和柱原理
维生素B12免疫亲和柱能够特异性的纯化样品中的维生素B12，将样品与提取液混合、提取、过滤，然后将滤液通过免疫亲和柱。此时，维生素B12物质键合在亲和柱中的抗体上。用蒸馏水将免疫亲和柱上的杂质除去。用甲醇通过分离柱，将维生素B12从抗体上分离下来。最后，将过滤的甲醇溶液注入HPLC或LC-MS进行测定。
优化：
维生素 B12家族中有四大成员：氰钴胺、甲钴胺、腺苷钴胺和羟钴胺。自然界中，微生物生物合成的维生素B12最终形式为甲钴胺、腺苷钴胺和羟钴胺；但是由于它们性质不太稳定，所以在工业提纯过程中人为地加入NaCN，使天然形式的维生素B12转化为性质更为稳定的氰钴胺。我们俗称的维生素B12，是指氰钴胺，我们食品中添加的维生素B12为氰钴胺，因此我们检测食品中的维生素B12只需检测氰钴胺，前处理不会用到NaCN，具体方法可与我们联系。
如应用亲和柱方法检测食品中维生素B12的检测方法，需要检测氰钴胺、甲钴胺、腺苷钴胺和羟钴胺总量的方法，请参考以下方法进行样品的前处理，然后再应用本亲和柱进行净化：
· AOAC2014.02:Improved_AOAC-FirstAction 2011.08 for the Analysis of Vitamin B12 in Infant Formula and Adult Pediatric Formulas First Action 2014.02(2)
· GB 5009.285-2022 食品安全国家标准 食品中维生素B12的测定
· GBT 5009.217-2008 保健食品中维生素B12的测定
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