植物类黄酮（Flavonoid）试剂盒-相关技术文章

来源：北京云肽生物科技有限公司 2025年02月17日 10:48

植物类黄酮（Flavonoid）试剂盒说明书

微量法 100T/96S

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：

类黄酮是一类多苯化合物，属于植物次生代谢物，对人体具有消炎，抗菌，降血脂，清除体内羟自由基，预防癌症等作用。

在碱性亚硝酸盐溶液中，类黄酮与铝离子形成在 510nm 处有特征吸收峰的红色络合物，测定样品提取液在 510nm 处的吸光值，即可计算样品类黄酮含量。

自备仪器和用品：

天平、烘箱、粉碎仪、筛子、超声破碎仪、60%乙醇、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、蒸馏水。

将样本烘干至恒重，粉碎，过 40 目筛之后，称取约 0.02g，加入 2ml 提取液，60℃振荡提取 2h，10000g， 25℃，离心 10min，取上清待测。

1、分光光度计/酶标仪预热 30min，调节波长至 500nm，蒸馏水调零。

2、操作表

	空白管	测定管
样本待测液（µl）		108

蒸馏水（µl）	108
试剂一（µl）	6	6
混匀，25℃静置 6min
试剂二（µl）	6	6
混匀，25℃静置 6min
试剂三（µl）	80	80
混匀，25℃静置 15 min，测定 510nm 处吸光值。ΔA=A 测定-A 空白，空白管只要做一管。

a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下标准曲线：y = 5.02x+0.0007，R² = 0.9996

类黄酮含量（mg/g 干重）=（ΔA -0.0007）÷5.02÷(W÷V 样总)= 0.398×（ΔA -0.0007）÷W V 样总：加入提取液体积，2.5ml； V 样：反应中样品体积，0.108ml； W：样品质量，g b.用 96 孔板测定的计算公式如下

标准曲线：y = 2.51x+0.0007，R² = 0.9996

类黄酮含量（mg/g 干重）=（ΔA -0.0007）÷2.51÷(W÷V 样总)= 0.797×（ΔA -0.0007）÷W V 样总：加入提取液体积，2ml；V 样：反应中样品体积，0.108ml；W：样品质量，g

*低检出限为 10µg/g。

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