培养基开发时怎样除去培养基中的支原体

在培养基开发过程中，除去培养基中的支原体是至关重要的，以确保细胞培养的健康和实验结果的准确性。以下是一些常用的方法来清除培养基中的支原体：

抗生素治疗：

使用抗生素是清除支原体的一种有效方法。常用的抗生素包括泰乐菌素、林可霉素、壮观霉素、喹诺酮和四环素等。

德国MB Zell Shield®细胞支原体祛除试剂是一种即用型的复合抗生素，可用于保护细胞培养体系免受支原体等污染物的干扰。

在使用抗生素时，需要根据支原体类型和药物敏感性选择合适的药物，并按照药物说明书进行操作。

热处理：

将细胞培养基加热至60℃以上可以有效地杀死支原体。然而，这种方法也会杀死细胞，因此只能在实验结束后或不需要保持细胞活性的情况下使用。

过滤：

使用过滤器可以将细胞培养基中的支原体过滤掉。但这种方法可能无法清除支原体，且对于小分子的支原体可能效果不佳。

更换培养基：

一旦发现支原体污染，应立即更换新的细胞培养基，以避免支原体繁殖并扩散到整个培养体系中。

细胞株更换：

如果细胞株本身存在支原体污染，应立即更换新的、未受污染的细胞株。

纯化清洗：

对于珍贵的细胞，可以通过纯化清洗的方法去除支原体。这通常涉及使用PBS或培养基洗涤细胞数次，并通过离心力分离细胞和支原体。

预防措施：

在培养基开发和细胞培养过程中，采取预防措施是防止支原体污染的关键。这包括定期对实验室环境进行消毒、对实验操作人员进行培训、以及定期对培养箱和其他实验设备进行维护和检查。

综上所述，清除培养基中的支原体需要综合使用多种方法，并根据具体情况选择合适的方法。同时，预防措施的采取也是至关重要的，以减少支原体污染的风险。