提取纯化产品册---04 柱式总RNA提取提取产品(RC201、RC411、RC401)
MiPure® Cell/Tissue miRNA Kit ( 离心柱型 )
细胞/组织miRNA 提取试剂盒(RC201)
miRNA提取效率高,起始量范围广 大分子RNA及基因组DNA残留更少 操作简便,兼容性强
保存条件:Box 1:4°C避光保存;Box 2:室温保存
产品概述
MiPure® Cell/Tissue miRNA Kit是基于硅胶柱吸附法开发的miRNA提取分离试剂盒,能有效提取长度20-200 nt的小片段RNA,包括miRNA、 siRNA等。高效的裂解液能轻松裂解各种动物组织和细胞,减少蛋白和杂质对产物的干扰,优化的硅胶吸附填料高效去除基因组DNA和大分子 RNA,保证产物的高产量和高质量。试剂盒也可用于提取Total RNA,>200 nt 的大分子RNA。
性能展示
使用MiPure® Cell/Tissue miRNA Kit与Total RNA提取试剂(如Trizol)分别从等量样本(细胞或小鼠肝脏组织) 中提取miRNA、Total RNA,琼脂 糖凝胶电泳检测等量产物,结果如图所示:对于细胞或小鼠组织,MiPure® Cell/Tissue miRNA Kit提取得到的产物中不含有大分子RNA,如 18S、28S RNA。
通过qPCR实验检测等量产物中miR-16基因,结果显示,MiPure® Cell/Tissue miRNA Kit对于小片段RNA (包含miRNA)的提取产量优于Trizol法。
操作流程概要
适用范围
10 - 100 mg 动物组织 / <5×106 培养细胞
组分
FastPure® Universal Plant Total RNA Isolation Kit
通用型植物 RNA 提取试剂盒 (RC411)
产品概述
本试剂盒适用于从植物组织中快速提取总RNA。试剂盒包括两套溶液体系,可以解决各种简单的植物组织(小麦、水稻、玉米、拟南芥、烟草、油菜等)、富含多糖多酚的植物组织(棉花叶、大豆叶、松针、银杏叶、无花果叶、栀子叶、小麦种子、玉米种子、红豆种子、土豆、红薯、大豆种子、芝麻种子、花生种子、油菜籽等)、水果果肉(西瓜、苹果、桃、梨、香蕉、芒果等)、真菌(香菇、口蘑、平菇、粗糙脉孢菌等)的RNA提取。试剂盒采用硅胶柱纯化技术,提取过程中无需使用酚CHCL3、β-巯基乙醇等有毒试剂,也无需耗时的醇类沉淀,整个提取过程只需11 min。FastPure gDNA-Filter Columns III能有效地去除杂质和gDNA,FastPure RNA Columns V能高效地结合RNA,搭配优化后的Buffer,得到的总RNA纯度高、gDNA残留少、无蛋白和其他杂质污染,可用于RT-PCR、荧光定量PCR、RNA建库、芯片分析、Northern Blot、Dot Blot和分子克隆等多种下游实验。
性能展示
简单快速
样本适用范围广
使用Vazyme #RC411 对不同植物样本(包括普通植物、水果果肉、多糖多酚植物)和部分真菌样本进行 RNA 提取,并进行1.2%琼脂糖胶电泳。从图中可以看出,Vazyme #RC411 提取试剂盒能兼容多种类型的植物样本和部分真菌样本,同时提取的RNA完整性好。
提取产量高
使用Vazyme #RC411与A、B 公司相关产品提取提取拟南芥叶、玉米叶的总RNA,并计算提取产物得率。从图中可以看出,Vazyme #RC411提取的RNA产量更高。
操作流程概要
适用范围
叶片、多糖块茎、块根、种子、水果果肉、真菌
组分 RC411-01(50 rxns)
Bufer PSL (40ml)
Bufer RWA (40ml)
Bufer RWB (12ml)
RNase-free ddH2O (10ml)
FastPure gDNA-Filter Columns III (each in a 2 ml Collection Tube) (50个)
FastPure RNA Columns V (each in a 2 ml Collection Tube) (50个)
RNase-free Collection Tubes 1.5 ml (50个)
Bufer EL:提供普通植物组织裂解所需的环境;
Bufer PSL:提供多糖多酚植物组织裂解所需的环境;
Bufer RWA:去除蛋白质、DNA 等杂质;
Bufer RWB:去除盐离子残留;
RNase-free ddH2O:洗脱总 RNA;
FastPure gDNA-Filter Columns III,吸附DNA,去除裂解杂志;
FastPure RNA Columns V:特异性吸附 RNA;
Collection Tubes 2 ml:收集滤液
RNase-free Collection Tubes 1.5 ml:收集 RNA
自备材料
无水乙醇、RNase-free枪头、研钵等。
样本制备
将新鲜或于 -85 ~ -65组织 ℃冻存的植物迅速转移至液氮预冷的研钵中,研磨组织,其间不断 加入液氮以保证组织处于低温状态,直至研磨成粉末状 ( 无明显颗粒,如果研磨不够充分, 会影响 RNA 提取效率和质量 )。
FastPure® Plant Total RNA Isolation Kit (Polysaccharides/Polyphenolics-rich)FastPure® Plant Total RNA Isolation Kit (Polysaccharides/Polyphenolics-rich)FastPure plant Total RNA Isolation Kit(Polysaccharides/Polyphenolics-rich)
多糖多酚植物总RNA提取试剂盒(RC401)
纯度高纯度高 获得的RNA纯度高,可直接用于下游纯度要求高的实验
通用性强 适用于富含多糖多酚植物组织与非多糖多酚植物组织中快速提取总RNA
简单快速 无需配备其他试剂、无需酚CHCL3抽提、常温下操作即可
基因组残留少 配有基因组DNA吸附柱,可有效去除DNA污染
保存条件:常温(15~25°C)保存
产品概述
本试剂盒适用于植物组织,特别是富含多糖多酚植物组织(如棉花叶片、成熟水稻叶片、松针、杨树、枇杷叶片、马铃薯块茎、棉叶根、香
本试剂盒适用于植物组织,特别是富含多糖多酚植物组织(如棉花叶片、成熟水稻叶片、松针、杨树、枇杷叶片、马铃薯块茎、棉叶根、香蕉、葡萄、苹果、梨、月季、荞麦种子、拟南芥种子、烟草等)中快速提取总RNA,同时可处理大量不同样品。试剂盒采用硅胶柱纯化技术,提取过程中无需使用酚氯仿等有毒试剂,也无需耗时的醇类沉淀。Fastpure gDNA-FilterColumnⅡ能够有效的分离上清和组织裂解物并吸附去除基因组,Fastpure RNA Column Ⅳ能高效的结合RNA,配以优化后的Buffer溶液,使得到的总RNA纯度高,无蛋白和其他杂质污染,可用于RT-PCR、Real Time RT-PCR、芯片分析、Northern Blot、DotBlot、PolyA筛选、体外翻译、RNase保护分析和分子克隆等多种下游实验。
性能展示
产量高,完整度好
使用Vazyme #RC401 分别提取50mg(香蕉果实、土豆块茎、月季花瓣、松针、芦苇叶片、鹅掌楸叶片、棉根、大豆叶片、水稻叶片),20 mg( 荞麦种子 ) 的 RNA,并进行 1% 琼脂糖凝胶电泳。从图中可以看出,Vazyme #RC401 样本兼容性好,对于多糖多酚与非多糖裂液氮研磨:植物样本在液氮中迅速研磨成粉末,取适量样本进行实验。 裂解液选择参照08-2/裂解液选择方案。多酚的植物样本,Vazyme #RC401 提取 RNA 完整度好,产量高。)
纯度高
分别使用Vazyme #RC401与T公司相关产品提取松针、月季花、水稻叶片的RNA。通过Onedrop分Vazyme #RC401 与 T 公司提取的不同植物样本的 RNA 进行测定,可以看出 Vazyme #RC401 与T 公司提取 RNA 的 OD260/280 比值接近,均为 2.0 左右,但 T 公司OD260/230 比值明显超出正常范围,说明使用 Vazyme #RC401 提取的植物 RNA 纯度明显高于 T 公司相关产品。
操作流程概要
适用范围:50-100mg 多糖多酚/非多糖多酚类样本(注:若为种子样本,建议上样量不高于20mg)
组分
自备材料
β- 巯基乙醇、无水乙醇、RNase-free 枪头、研钵、水浴锅或金属浴等。
△Buffer PRW2 需在使用前添加一定量的无水乙醇
样本制备及提取流程
A. 多糖多酚植物样本提取流程
样本制备
液氮研磨:50 - 100 mg植物样本在液氮中迅速研磨成粉末,加入已于65℃预热的500 μl Buffer PRL,立即剧烈涡旋震荡30 - 60 sec。
①对于水分含量少的样本如成熟的叶片、种子,淀粉含量高的块茎等样本投入量不高于 20 mg;水分含量多的样本如草莓、西瓜果实等可适量增加样本投入量。
②实验前确保 Buffer PRL 中已加入 5% β- 巯基乙醇(如每 475 μl Buffer PRL 加 25 μl β - 巯基乙醇),颠倒混匀后 65 ℃ 预热。裂解液建议现配现用。Buffer PRL 加入 β-巯基乙醇后可在 2 - 8℃保存一个月。
③液氮研磨后的样本如不立即进行下一步操作,可置于-70℃保存。
④使用前请检查 Buffer PRL 中是否有晶体析出。若有晶体析出,可将 Buffer PRL 放置 65℃加热使晶体溶解,混匀后方可使用。
⑤样本处理:样品处理量不要超过基因组去除柱和 RNA 吸附柱的吸附能力,否则造成 DNA 残留或产量降低。开始摸索实验条件时,样本适宜的起始投入量 ≤50 mg,将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
B. 非多糖多酚植物样本提取流程
样本制备
液氮研磨:
50 - 100 mg植物样本在液氮中迅速研磨成粉末,加入已于65℃预热的500 μl Buffer PRL Plus,立即剧烈涡旋震荡30 - 60 sec。
①对于水分含量少的样本如成熟的叶片、种子,淀粉含量高的块茎等样本投入量不高于 20 mg;水分含量多的样本如草莓、西瓜果实等可适量增加样本投入量。
②实验前确保Buffer PRL Plus中已加入5% β-巯基乙醇(如每475 μl Buffer PRL Plus加25 μl β-巯基乙醇),颠倒混匀后65 ℃ 预热。裂解液建议现配现用。Buffer PRL Plus加入β-巯基乙醇后可在 2 - 8℃保存一个月。
③液氮研磨后的样本如不立即进行下一步操作,可置于-70°C保存。
④样本处理:样品处理量不要超过基因组去除柱和 RNA 吸附柱的吸附能力,否则造成 DNA 残留或产量降低。开始摸索实验条件时,样本适宜的起始投入量 ≤50 mg,将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
提取流程
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