产品推荐:气相|液相|光谱|质谱|电化学|元素分析|水分测定仪|样品前处理|试验机|培养箱


化工仪器网>技术中心>其他文章>正文

欢迎联系我

有什么可以帮您? 在线咨询

慢病毒浓缩液:病毒回收率高达92%

来源:和元李记(上海)生物技术有限公司   2025年01月10日 16:06  

慢病毒载体可感染分裂细胞及非分裂细胞。其转移基因片段容量较大,目的基因表达时间较长,不易引发宿主免疫反应等诸多优点;因此,慢病毒己经成为表达外源基因或外源shRNA的常用载体形式之一, 并且应用越来越广泛。

慢病毒浓缩液介绍

EZ慢病毒浓缩液是一种快速浓缩慢病毒的产品,使用未浓缩病毒上清与本产品低温孵育后低速离心即可获得浓缩病毒液。不同于传统的耗时耗力的超滤、超速离心法,使用本产品操作简便、快捷、安全,回收率高。

慢病毒浓缩液优势

 ✔ 高浓缩比:浓缩体积高达240倍,如:可将120mL的病毒上清浓缩至500uL;

 ✔ 高回收率:经测试,病毒的回收率高达92%;

 ✔ 高浓缩滴度:经测试,使用本产品浓缩后病毒滴度往往可达108或109高病毒;

 ✔ 高病毒活性:浓缩后病毒具有更佳的转导效果。

慢病毒浓缩液操作步骤

① 收集 48 h 和 72 h 的 293T 细胞慢病毒上清液,4℃, 2000 g 离心 10 min。 

② 上清液用 0.45 μm 滤膜过滤,去除细胞碎片。【注】:滤膜需使用低蛋白吸附的纤维素醋酸酯或聚醚 砜(PES)膜。切忌用硝酸纤维素膜(NC)。 

③ 按慢病毒过滤液体积:浓缩试剂体积= 4:1 比例混合,摇匀,4℃ 静置过夜,或冰上孵育至少 3 h,适当 延长孵育时间可提高慢病毒的回收率。 

④ 完成孵育后,4℃,3500 g 离心 15 min,小心吸去上清液。

⑤ 用适量体积 PBS 轻轻反复吹吸病毒沉淀,重悬慢病毒。 

⑥ 留少许病毒液测定滴度,其他分装后保存于-80℃。【注】:因冻融会显著降低慢病毒活性,请务必分 装保存。

慢病毒浓缩液注意事项

 • 本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。

 • 慢病毒相关实验操作请在生物安全柜内完成。

 • 注意将浓缩试剂和病毒液充分混合。

 • 细胞的生长状态对于病毒包装至关重要,因此需保证良好的细胞生长状态和较少的细胞传代次数。

 • 病毒切勿反复冻融,如果实在需要冻融,次数尽量不要超过 3 次,每冻融一次大约有 10%左右的病毒损失,应按照每次使用的病毒量来分装,保存于-80℃。保存时间尽量不要超过 6 个月。

免责声明

  • 凡本网注明“来源:化工仪器网”的所有作品,均为浙江兴旺宝明通网络有限公司-化工仪器网合法拥有版权或有权使用的作品,未经本网授权不得转载、摘编或利用其它方式使用上述作品。已经本网授权使用作品的,应在授权范围内使用,并注明“来源:化工仪器网”。违反上述声明者,本网将追究其相关法律责任。
  • 本网转载并注明自其他来源(非化工仪器网)的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点和对其真实性负责,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品第一来源,并自负版权等法律责任。
  • 如涉及作品内容、版权等问题,请在作品发表之日起一周内与本网联系,否则视为放弃相关权利。
企业未开通此功能
详询客服 : 0571-87858618