人白细胞介素-8 ELISA试剂盒的检测方法

来源：上海牧荣生物科技有限公司 2024年10月16日 13:19

人白细胞介素-8（IL-8）ELISA试剂盒的检测方法通常包括以下步骤：

1.材料准备

试剂盒组件：包括ELISA板、标准品、检测抗体、酶标记二抗、底物溶液、终止液等。

样品：血清、血浆或细胞培养上清液。

设备：微孔板酶标仪、移液器、离心机等。

2.样品准备

收集血清或血浆样本，按照试剂盒说明进行稀释（如果需要）。

3.标准品准备

按照试剂盒说明书的指示，将标准品按照不同浓度稀释，并设置标准曲线。

4.ELISA板的涂布

加样：向每个孔中添加标准品、样品和空白对照。通常每个标准和样品重复2-3次。

孵育：在37°C孵育一定时间（一般为1-2小时，具体时间参照说明书）。

5.洗涤

使用洗涤液洗涤ELISA板，去除未结合的物质。通常需要洗涤3-5次。

6.添加检测抗体

向每个孔中加入酶标记的检测抗体，孵育一定时间。

7.再次洗涤

进行洗涤以去除未结合的抗体。

8.添加底物

向每个孔中加入底物溶液，通常在暗处孵育15-30分钟，直至出现显色。

9.终止反应

添加终止液，停止底物反应。

10.测量

使用酶标仪在特定波长（通常为450nm）下读取各孔的光密度（OD值）。

11.数据分析

根据标准曲线计算样品中IL-8的浓度。

注意事项

确保所有试剂和样品在使用前充分混匀。

严格按照说明书进行操作，以保证实验结果的准确性。

做实验时尽量避免样品的重复冻融，以免影响结果。

通过以上步骤，您可以测定样品中人白细胞介素-8的浓度。

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