ReadyAMP®PCR直接扩增技术应用在油菜叶中的流程

ReadyAMP^®PCR直接扩增技术应用在油菜叶中的流程

基因工程油菜作为全球种植面积增长最快的作物广受科学家的关注。而油菜籽拥有丰富的油脂含量，使得油菜成为一种十分重要的油料作物。常见的转基因油菜方向包括品种改良、抗病、抗虫、抗除草剂等，想要获得一系列优良品种，则需要面对大量待筛选叶片。目前实验室提取基因组DNA的技术手段很多，例如CTAB法、离心柱提取法。但是以上方法操作步骤多、费时费力、效率极低，大大降低了实验室研究人员的积极性。一旦遇到田边采样，还面临着采样周期，快递回实验室检测等长周期检测过程，无法做到即采即做。

从经济角度考虑，目前应用于油菜叶片中提取基因组DNA的方法主要为CTAB法。该方法局限性很大，例如油菜叶取材量大、步骤多、离心步骤多、使用某些有毒有害试剂，且无法高通量操作。随着田边诊断的推进，加上逐年增加的油菜叶检测量，传统方法已经不能满足实验室需求，我司开发的ReadyAMP^®油菜叶直接PCR扩增试剂盒能够快速、精准检测到目的基因。此方法优点如下：

—对样本量要求不高

—操作简单快速

—不用液氮研磨

—不用离心

—不使用蛋白酶和有毒有害有机试剂

案例A 油菜叶片扩增12对基因

RL：油菜叶片  +：植物基因组试剂盒提取基因组（20×） —：阴性对照

取油菜叶3mm，直接置于ReadyAMP^®油菜叶片直接PCR扩增试剂盒（货号Nu-RAR01）中，扩增12个不同长度基因，用植物基因组提取试剂盒（货号Col-D04）提取基因组为对照（基因组20×稀释）。