QIAamp Power Fecal Pro DNA Kit在PowerFecal原有技术的基础上,采用新型微球管和优化的化学成分,可更高效地裂解细菌和真菌。抑制剂的去除已经简化,使研究人员能够更快地从粪便和肠道样本中消除具有挑战性的抑制剂。这导致总 DNA 通过在下游测试中观察到的操作分类单元 (OTU) 揭示更高的 α 多样性。采用简化的抑制剂去除技术(Inhibitor Removal Technology,IRT),在去除抑制剂方面效率高,同时还能缩短样品处理时间。QIAamp PowerFecal Pro DNA试剂盒的A260/A280比值也最高,接近1.8,表明其不含抑制剂。使用QIAamp PowerFecal Pro DNA Kits处理的样品之间的变异性也较小。与第一代QIAamp PowerFecal Pro DNA Kit和其他市售试剂盒相比,使用QIAamp PowerFecal Pro DNA Kit的研究人员可以从粪便样本中鉴定出更大的细菌多样性和OTU数。
二、凯杰qiagen粪便DNA提取试剂盒51804实验步骤
1.称取200ul样品在2ml的离心管中,离心管放在冰上。
2.每个样品添加1mlInhibitEXBuffer,然后持续旋涡混合1min或者直到样品混合均匀。
3.在70℃加热悬浮液5min(难以溶解的细胞溶解温度可以提高到95℃),然后旋涡混合15s。
4.离心样品1min析出沉淀。
5.另取1.5ml离心管加15ulProteinaseK。
6.移取200ul步骤4的上清液至1.5ml含ProteinaseK的离心管中。
7.然后添加200ulBufferAL,旋涡混合15s。(注意:不要直接添加ProteinaseK到BufferAL中,样品和BufferAL必须充分混合成均匀混合液)
8.70℃孵育10min。
9.添加200u1乙醇到溶解液中,旋涡混合。
10.小心移取600ul步骤9的裂解液到QIAamp旋转柱中,盖上盖子,离心1min。
把QIAamp旋转柱放到一个新的2ml的收集管中,丢掉含有滤液的管。11.小心打开QIAamp旋转柱,添加500ulBufferAW1,离心1min。把QIAamp旋转柱放到一个新的2ml收集管中,丢掉包含滤液的收集管。
12.小心打开QIAamp旋转柱,添加500ulBufferAW2,离心3min,丢掉包含滤液的收集管。
13.把QIAamp旋转柱放到一个新的2ml的收集管中,丢掉旧的含有滤液的收集管,离心3min。
14.把QIAamp旋转柱放到一个新的1.5ml的离心管,直接移取200ulBufferATE
到QIAamp薄膜上。室温孵育1min,然后离心1min洗提DNA。通过UV吸收度判断DNA纯度,使用BufferATE做空白设计避免结果错误。
三、凯杰qiagen粪便DNA提取试剂盒51804注意事项
1.准备好70℃水浴锅。
2.所有的离心操作都在室温下(15-25℃),14000转/分钟
3.用BufferAL和InhibitEXBuffer溶解任何沉淀都要加热和混匀。
4.Buffer AW1和Buffer AW2都加乙醇。
5.使用之前混合所有缓冲液。
四、凯杰qiagen粪便DNA提取试剂盒51804规格表
货号 | 产品名称 | 规格 |
51804 | QIAamp PowerFecal Pro DNA Kit | 50 preps |
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