蜈蚣中黄曲霉毒素等11种真菌毒素液质质检测方法

一、药典和测定法要求：

根据《中国药典》2020年版规定：中药材蜈蚣及饮片需检测水分、总灰分和黄曲霉毒素，其中黄曲霉毒素按照真菌毒素测定法（通则2351）测定，“本品每1000g含黄曲霉毒素B1不得超过5μg，黄曲霉毒素B1，黄曲霉毒素B2，黄曲霉毒素G1，黄曲霉毒素G2的总量不超过10μg”。

真菌毒素测定法（通则2351）：多种真菌毒素检测的液质质法说明如下：

此方法充分利用液质质仪器的高灵敏度和高精确度的优势，一次进样分析多种真菌毒素，大大提高了效能，节约人力和时间成本，因此越来越多地实验室开发了多种真菌毒素检测的液质质方法。

真菌毒素测定法（通则2351）中，上述筛查测定方法的前处理净化采用传统HLB柱，经过活化、平衡、淋洗、洗脱地过程后，采用外标法进行定量分析。此方法比采用若干种免疫亲和柱的前处理净化方法简便许多，但仍然被困于传统SPE的操作步骤，前处理步骤仍显繁琐。

二、FaTEx-CM 蜈蚣中真菌毒素检测专用柱

因此我们开发出FaTEx-CM 蜈蚣中真菌毒素检测专用柱，原理上通过填料保留杂质，所得滤液极为目标物，不需要活化平衡淋洗洗脱，操作步骤极其简单，节省试剂、设备和耗材，因此在大大提高效率地同时，节省大量的人力和费用成本。

同时，此蜈蚣真菌毒素专用柱复合多种有效成分材料填充在净化柱中，开发专用的操作方法平衡11种真菌毒素的回收率和RSD，经过若干次地不懈努力，终于取得合适配方和操作步骤。通过一次FaTEx-CM蜈蚣专用柱的净化处理，上机到LC-MSMS分析，得到的结果符合定量分析的法规要求。

三、前处理方法之蜈蚣中真菌毒素检测专用柱

² 蜈蚣均质后，称取样品2g左右

² 加一定体积V1的去离子水，静置10分钟

² 加一定体积V2的酸化乙腈水溶液震荡萃取30min

² 15℃，3500 rpm离心5min

² 取一定体积的上清液V3倒入FaTEx-CM_2vac专用柱，每秒1滴流出

² 收集全部滤液，取一定体积V4的滤液，加一定体积V5的去离水稀释

² 0.22µm filter过滤后上机LC-MS/MS分析

四、仪器分析方法

五、11种真菌毒素的清单，欢迎联络询问回收率和RSD