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实时荧光定量技术服务
— 华夏远洋明星产品
*部分、背景知识
实时荧光定量PCR（Real-time PCR）即通过荧光染料或荧光标记的特异性探针对PCR反应过程进行实时监测，根据PCR指数扩增期间荧光信号的变化来即时测定对应特异产物的含量，并据此推断目的基因的初始量。该方法可以检测细胞、组织或微生物中基因表达变化，比较不同组织的mRNA表达差异。如不同药物浓度处理后相关基因表达水平高低变化；验证基因芯片结果；siRNA干扰的实验结果等。与常规PCR（RT-PCR）相比，实时荧光定量PCR具有*的灵敏度、高度的重复性和的特异性。因为PCR扩增过程闭盖操作，避免了反应产物的污染，大大提高了结果的可靠性，现已成为现阶段*的核酸分子定量检测的金标准，在基因表达研究和临床疾病检测等领域已得到广泛应用。
第二部分、为何称之为明星产品？
服务：
一、 实验设备：所用荧光定量PCR仪为伯乐（BIO-RAD）公司仪器；
二、 试剂耗材配备：所用试剂为SYBR Green I 的升级替代产品Eva Green，*白色低腰八联排管；
三、 论文发表标准：论文可发表在国外任何影响因子的刊物上；
四、 参观学习：实验中，客户可以随时来参观学习询问；
五、 实验要求：根据客户要求每个反应免费重复2-3次。样本在60个以上，基因3个或以上（含内参），RNA提取和反转录项目免费。
第三部分、技术流程
1、RNA的提取；
2、DNase I 消化RNA中残留的DNA；
3、琼脂糖凝胶电泳，判断RNA的质量；
4、RNA反转录为cDNA；
5、引物设计、合成、验证，反应体系和反应条件优化；
6、上机检测：包括扩增曲线、溶解曲线；
7、数据整理、表达量计算、作图；
8、实验报告的书写，包括详细的仪器、耗材、试剂、引物信息、反应体系、实验条件、实验图片、实验数据及结果分析。
第四部分、送样要求
细胞（≥106）、组织（≥100mg）、血液（≥1ml）、叶片（≥100mg）等样品材料，基因组DNA或总RNA（体积≥20μl，浓度≥50 ng/μl）。外地客户可以干冰邮寄，北京客户直接公司专员取样。
第五部分、背景资料
客户提供物种信息、GeneBank号、目的基因名称或特异基因的序列。
第六部分、提供结果
实验所用所有仪器试剂及耗材、引物序列；RNA电泳图和PCR特异性电泳图；详细的实验过程；原始数据（包括扩增曲线和熔解曲线）及数据分析结果。
第七部分、服务内容、报价、周期
| 服务编号 | 服务项目 | 实验说明 | 价格 | 周期 |
| HX-R1 | RNA提取 | 包括RNA提取、DNase I消化残留的DNA、RNA电泳 | 100元/样品 （样品大于30个半价） | 2-6个工作日 |
| HX-R2 | 反转录 | 反转录、内参基因测试 | 80元/样品 （样品大于30个半价） | 2-6个工作日 |
| HX-T1 | 探针合成 | 探针设计、合成、验证 | 2000元/基因 | 5-10个工作日 |
| HX-S1 | 相对定量-染料法 | 引物设计、合成、验证、上机检测、3次实验重复，数据分析。 | 180元/基因·样本 （10个样品以上起做） | 5-15个工作日 |
| HX-S2 | 相对定量-TaqMan探针法 | 引物设计、合成、验证、上机检测、3次实验重复，数据分析 | 180元/基因·样本 （10个样品以上起做） | 5-15个工作日 |
| HX-S3 | 定量染料法 | 引物设计、合成、验证、上机检测、3次实验重复，数据分析 | 180元/基因·样本 （10个样品以上起做） | 5-15个工作日 |
| HX-S4 | 定量TaqMan探针法 | 引物设计、合成、验证、上机检测、3次实验重复，数据分析 | 180元/基因·样本 （10个样品以上起做） | 5-15个工作日 |
| HX-05 | 构建标准品 | PCR扩增、纯化、OD值检测、浓度计算 | 600元/基因 | 2-6个工作日 |
| HX-06 | 标准曲线 | 制作标准曲线 | 800元/基因 | 2-6个工作日 |
【收款方式：本公司所有科研服务均收取60%预付款，实验完成后，1个月内结清尾款。具体优惠方式和细节欢迎您来信或。】
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北京华夏远洋科技有限公司
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电子邮件：huaxiabio
华夏远洋生物商城：www.华夏远洋.com www.huaxiatech.com.cn www.huaxiatech.cn
华夏远洋生物商城丁香通（丁香园）会员：www.biomart.cn/huaxiabio
地址：商务办公-北京市丰台区新村一里15号53楼 库房发货-北京市海淀区黑山扈路西北旺甲2号
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