永生小鼠雪旺细胞表达神经胶质细胞标记物(S100,GFAP,p75NTR);参与施旺细胞发育和外周髓鞘形成的转录因子(Krox2、Oct6、PAX3和SOX10);和神经营养因子(NGF、BDNF、GDNF和CNTF)。
在生长因子如PDGF-BB、aFGF、bFGF或TGF-β1存在的情况下,这些细胞表现出有丝分裂反应。IMS32细胞可用于研究参与外周神经再生的作用机制,并作为评估神经疾病发病机制的体外模型。用于检测细胞标志物的免疫反应性。
艾美捷abm永生化小鼠雪旺细胞基本参数:
货号:T0295
名称:永生化小鼠施万细胞(IMS32)
生物体:小鼠(M. musculus)
组织:大脑
供体历史:ICR 小鼠
生长特性:贴壁,纺锤形
细胞类型:永生化细胞
储存条件:液氮的气相,或低于-130°C。
运输条件:干冰运输。
产品格式:冷冻
预期用途:本产品仅用于实验室研究。不适用于任何动物或人类的治疗用途,任何人类或动物的消费,或任何诊断用途。
生物安全等级:II
生长条件:
建议使用 PriCoat™ T25 烧瓶(G299)或应用细胞外基质(G422)以促进细胞对培养容器的粘附。PriGrow III (TM003) + 10% FBS + 1% 青霉素/链霉素溶液(G255),37.0°C,5% CO₂。
冷冻保存:
使用冷冻保存培养基(TM024),或含有10% DMSO的wan全生长培养基进行冷冻保存。
细胞播种密度(每平方厘米细胞数):50,000 - 60,000
细胞群倍增时间(小时):45 - 55
永生化方法:自然永生化
表达:
表达胶质细胞标记物(S100, GFAP, p75NTR)、参与施万细胞发育和周围髓鞘形成过程中的转录因子(Krox20, Oct6, PAX3, 和 SOX10),以及神经营养因子(NGF, BDNF, GDNF, 和 CNTF)。
材料引用:
如果使用此材料导致科学出版物的发表,请按照以下方式引用材料:Applied Biological Materials Inc, 目录编号 T0295。
拆包和储存指南:
1. 目视检查包装容器是否有泄漏或破损的迹象。
2. 立即将冷冻细胞从干冰包装中转移到-130°C以下的温度中,最好在液氮气相储存中,直到准备使用。
为了确保最高的活性水平,在收到后尽快解冻小瓶并开始培养。如果需要继续储存,小瓶应仅储存在-130°C以下或液氮气相中。不要在-70°C储存,因为这会导致活性丧失。
解冻程序:
1. 在37°C水浴中快速解冻细胞,同时轻轻摇晃(最多2分钟)。小瓶盖应保持在水面以上,以最小化污染风险。
2. 用70%乙醇喷洒并擦拭小瓶外部以消毒。从这一点开始,所有操作都应严格在生物安全柜内使用无菌条件进行。
3. 将细胞悬浮液转移到含有5ml预热的wan全生长培养基的15ml无菌圆锥管中。以125xg离心细胞5-7分钟。
4. 在不干扰细胞沉淀物的情况下吸去上清液。将细胞沉淀物重新悬浮在推荐的预热的wan全生长培养基中,并分装到T25培养瓶中。
5. 在推荐的条件下培养细胞。
传代程序:
下面给出的体积是针对T75瓶的;根据培养容器的大小按比例增加或减少体积。当培养容器80%充满时传代细胞。
1. 吸去培养基,并加入2-3ml预热的0.25% Trypsin-EDTA到培养容器中。
2. 在显微镜下观察细胞以确认脱落(通常在2-10分钟内)。难以脱落的细胞可以放在37°C下,几分钟以促进脱落。
3. 通过向培养容器中加入相等体积的wan全生长培养基来中和Trypsin-EDTA。
4. 将培养悬浮液转移到无菌离心管中,并以125xg离心5分钟。实际的离心持续时间和速度可能因细胞类型而异。
5. 吸去上清液,并用预热的新鲜wan全生长培养基重新悬浮沉淀物。根据需要将适量的细胞悬浮液添加到新的培养容器中。
6. 在推荐的条件下培养细胞。
永生化小鼠雪旺细胞文献参考:
Watabe, K., Fukuda, T., Tanaka, J., Honda, H., Toyohara, K., & Sakai, O. (1995). Spontaneously immortalized adult mouse Schwann cells secrete autocrine and paracrine growth-promoting activities. Journal of neuroscience research, 41(2), 279–290.
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