人结直肠腺癌细胞LS174T传代方法
慧颖生物热卖细胞：

人多发性骨髓瘤细胞RPMI-8226 1×10⁶cells T25培养瓶 RPMI1640培养基；10%胎牛血清；1%双抗 悬浮生长 提供STR鉴定报告

人结直肠腺癌细胞LS174T 1×10⁶cells T25培养瓶 MEM培养基；10%胎牛血清；1%双抗 贴壁生长 提供STR鉴定报告

人多形性恶性胶质瘤T98G 1×10⁶cells T25培养瓶 MEM培养基；10%胎牛血清；1%双抗 贴壁生长 提供STR鉴定报告

人胆管癌细胞HuCCT1 1×10⁶cells T25培养瓶 RPMI1640培养基；10%胎牛血清；1%双抗 贴壁生长 提供STR鉴定报告

人子宫内膜癌细胞Ishikawa 1×10⁶cells T25培养瓶 DMEM培养基；10%胎牛血清；1%双抗 贴壁生长 提供STR鉴定报告

人葡萄膜黑色素瘤92-1 1×10⁶cells T25培养瓶 RPMI1640培养基；10%胎牛血清；1%双抗 贴壁生长 提供STR鉴定报告

人结肠癌细胞HCT-116 1×10⁶cells T25培养瓶 McCoy’s 5A培养基；10%胎牛血清；1%双抗 贴壁生长 提供STR鉴定报告

人非小细胞肺癌细胞NCI-H3122 1×10⁶cells T25培养瓶 RPMI1640培养基；10%胎牛血清；1%双抗 贴壁生长 提供STR鉴定报告

人胰腺癌细胞HPAC 1×10⁶cells T25培养瓶 DMEM培养基；10%胎牛血清；1%双抗 贴壁生长 提供STR鉴定报告

人肝癌细胞SNU-398 1×10⁶cells T25培养瓶 RPMI1640培养基；10%胎牛血清；1%双抗 贴壁，悬浮混合生长 提供STR鉴定报告

人结直肠腺癌细胞LS174T传代方法

1、提前打开水裕锅，加热到37度，从液氮 罐中取出需要复苏的细胞；

2、放水裕锅快速解冻(中途不要随意拿出冻 存管直到冻存管中的液体全部融化)准备细 胞专用培养基和无菌离心管培养基需提前预 热

3、用完培稀释冻存管中的细胞悬液至离心 管中收集细胞至元南离心管，800-1100 rp/5min，取出离心管，管底可见细胞沉淀

4、去除上清，用5ml完培重悬离心管中的 细胞液至T25瓶中，十字摇晃均匀；放入培 养箱，隔天观察

传代
1、准备所需耗材紫外消毒30分钟，观察细胞密度 80%即可传代； 2、去掉旧培养基，加入3mIPBS缓冲液轻轻润洗后去 除，加入1ml胰酶，均匀覆盖细胞表面(胰酶需提前预 热)； 3、细胞消化至变圆，轻拍瓶身滑落.加入4ml完培终 止消化，收集消化下来的细胞至无菌离心管， 800-1100 rpm/5min 4、取出离心管，管底可见细胞沉淀，准备两个T25瓶 ,各加入2.5ml培养基； 5、离心管内去上清，用5ml完培重细胞悬液，分装至 2个T25瓶，十字摇晃均匀放入培养箱，隔天观察；

特殊细胞收到注意事项

部分细胞由于贴壁不牢在运输过程中发生细胞脱落，这是正常现象正确处理后都可以正常生长。 1、将培养瓶内所有培养基转入无菌离心管，离心收集细胞（1200rpm3-5min）去除旧培养基； 2、用PBS重悬细胞，将所有细胞收集到一个离心管中，再次离心（1200rpm3-5min）去除PBS； 3、加入1ml左右0.25%胰酶重悬细胞，混匀即可，不能吹打太多次，放入培养箱消化，根据细胞特性决定消化时间（约1~2分钟） 4、消化好后，用移液枪轻轻吹打细胞悬液，使细胞团分散，迅速加入3-5ml培养基混匀以终止消化，离心 （1200rpm3-5min） 去除胰酶； 5、加入5ml左右的细胞相应的培养基混匀，按比例接入无菌培养瓶/皿中； 6、显微镜下观察看细胞是否成均匀分散的单颗细胞，若有3-5个成团的小细胞团可不用重新消化，使之贴壁后待细胞生长稳 定后再消散细胞。