1. 检查设备：确保高压蒸汽灭菌锅的外观完好，并且所有控制开关和指示灯正常工作。

2. 加水：打开高压蒸汽灭菌锅顶部的进水阀，将清洁净化水或蒸馏水倒入蒸汽锅内，使水位达到设定标志线。注意水位不低于加热圈，且在挡板以下。

3. 放置物品：将需要灭菌处理的物品（如培养基、蒸馏水或其他器皿）清洁后放入高压蒸汽灭菌锅内，注意物品之间要留有空隙，且不要超过设定的容量。

4. 密封锅盖：将高压蒸汽灭菌锅的门或盖严密地关闭，并确保锁紧装置牢固。

5. 设定参数：根据实际情况和要求，在控制面板上设定好灭菌温度（如普遍规则为含葡萄糖培养基115℃，不含葡萄糖的培养基121℃）、时间（如普遍规则为含葡萄糖培养基30分钟，不含葡萄糖的培养基20分钟）等参数。

6. 启动设备：插上电源，将高压蒸汽灭菌锅启动，开始进行灭菌处理。

7. 灭菌完成后，需等待灭菌锅内的温度降至安全范围（如60℃以下）且压力降为0时，才能打开锅盖取出物品。

8. 后处理：根据需求对灭菌后的物品进行后处理，如迅速封装或使用，避免二次污染。

此外，在使用高压蒸汽灭菌锅时，还需要注意以下事项：

1. 只有专业人员才能操作高压蒸汽灭菌锅，应经过相关培训并熟悉设备的使用说明书。

2. 保持设备周围的通道畅通，设备上方的排气系统应连接到安全通风处。

3. 在灭菌过程中，应不断监测设备内的温度和压力变化，以确保灭菌效果。

4. 在取出物品之前，应仔细检查物品的整体状况和灭菌效果，如有异常应及时处理。