问：传统酶切酶连要花好久的时间，光是载体、片段酶切都要花上1-2个小时，还要纯化片段，T4 DNA连接酶的连接甚至需要过夜，能不能有一款试剂省去这些步骤呀？

小翌：不用担心，小翌这里有一款产品，Hieff Clone®系列克隆试剂盒仅需一步就能帮您连接上载体和片段，单片段的连接时间快至5分钟，大幅度节省您的科研时间！

问：现在实验室都是送样测序，可是平板上的菌落数长得太少，无法确定一次连接成功，而送一次平板测序价格又很高，重新送测又好麻烦，要怎么办？

小翌：Hieff Clone®系列克隆试剂盒的载体、片段连接阳性率可达95%以上，克隆数多，一次送样检测成功率极大提升！

图1. 两片段（3 kb）连接。结果显示，10923ES菌落数多，阳性率100%。A：重组转化平板。载体（11.6 kb）和插入片段（3 kb）摩尔比为1:2。B：插入片段PCR鉴定电泳图，M：Yeasen 10505ES。

问：糟糕！我的实验样本太珍贵，是老师去野外采集时好不容易取回的，提取的DNA片段只有10 μL（5 ng），连接体系20 μL，至少需要添加60 ng才能连上载体，可是DNA片段还想保留一些，能减少片段投入量或者缩小连接体系吗？

小翌：可以的，新款克隆试剂盒（Cat#10923ES）连接总体系可低6 μL，载体、片段投入量低，可以充分满足您的需求，为您节省珍贵的样本！

图2. 在6 μL小体系非复苏感受态下，连接10 ng低投入量单片段。结果显示，10923ES性能好于竞品，连接效率高，菌落数多，阳性率达100%。A-B：重组转化平板。载体（10 kb）和插入片段（1 kb）摩尔比为1:2。C：插入片段PCR鉴定电泳图，M：Yeasen 10505ES。

图3. 10923ES超小体系连接三片段，连接效率，阳性率达100%。3 μL总体系连接，10923ES的投入量可低至2 μL。A&C&E：25 ng载体（11.6 kb）+各10 ng片段（1 kb+1.6 kb+1.8 kb）。B&D&F：插入片段PCR鉴定电泳图。

图4. 分别连接低浓度的五片段和六片段。结果显示，10923ES在低浓度下连接性能稳定，菌落数多，阳性率100%。A-B：重组转化平板。载体（11.6 kb）和插入片段（5片段共5.6 kb、六片段共7.6 kb）摩尔比为1:2。C-D：插入片段PCR鉴定电泳图，M：Yeasen 10505ES，菌P长度2.6 kb。

问：我要构建一个新的载体，载体上需要含有6个外源基因片段，可是一次最多连上1-2个片段，每次都得重新设计同源臂、连接、转化、挑菌、筛选，这一些系列操作至少要一周，就不能一次连上6个片段吗？

小翌：收到！小翌最新研发的克隆试剂盒可以一次性连接6个片段到载体上，连接时间缩短至50 min，为您解决烦忧！

图5. 六片段（7.6 kb）连接。结果显示，10923ES产品性能好于竞品，菌落数多，阳性率100%。A-B：重组转化平板。载体（11.6 kb）和插入片段（7.6 kb）摩尔比为1:2。C：插入片段PCR鉴定电泳图，M：Yeasen 10505ES，菌P长度2.6 kb。

图6. 在37℃条件下放置7天，结果显示，10923ES在低浓度下依旧稳定连接六片段。D-F：重组转化平板。载体（11.6 kb）和插入片段（六片段共7.6 kb）摩尔比为1:2。H：插入片段PCR鉴定电泳图，M：Yeasen 10505ES，菌P长度2.6 kb。

图7. 10 μL小体系单片段连接和点突变克隆，10923ES阳性率达100%。A&C：重组转化平板。B：插入片段PCR鉴定电泳图，泳道1-5分别为菌落1，菌落2，阴性对照，阳性对照（基因组作为模版），阳性对照（PCR纯化片段作为模版）。D：插入片段PCR鉴定电泳图。

以上就是这么多年来，小翌接收到的真实反馈，面对用户的各种问题，翌圣研发人员努力钻研，通过内部的双向分子酶理性设计与定向进化平台，不断设计、优化克隆试剂盒中的核心重组酶，并添加 的重组增强因子，抑制非同源末端连接，在保证克隆阳性率达到95%以上的同时，还能够又快又好的完成实验，助力发表高分文章。

在此基础上，第三届翌圣生物杯“克隆王”挑战赛也即将拉开序幕，它不仅是对过往成果的一次集中展示，更是面向未来、促进技术交流与创新的崭新起点。小翌诚邀每一位科研追梦人共同参与，通过克隆试剂盒，展现你们的克隆艺术，希望通过这场比赛，为大家搭建起一座沟通的桥梁，促进克隆技术的深度交流与智慧碰撞，携手在这条基因奥秘的发现之旅上贡献自身力量！

小翌温馨提示：2024年5月9日前，扫描下方二维码填写报名信息，可获得5分附加分，先报先得哦~

【克隆王挑战赛预报名码】

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