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DNase Ⅰ(蛋白提取用)使用说明

来源:上海尚宝生物科技有限公司   2024年05月06日 11:41  

DNase Ⅰ(蛋白提取用)

产品货号:T11190

 

产品规格:10KU

 

产品简介:

脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNaseⅠ)是一种非特异性核酸酶切酶,可用于降解单链或双链DNA,其原理为DNaseⅠ水解磷酸二酯键产生带有5'-磷酸基团和3'-OH的单核苷酸或寡核苷酸本产品能迅速水解核酸,降低粘度以减少处理时间和增加蛋白产量。该酶可以与细菌蛋白提取液和RIPA裂解液等蛋白抽提试剂配合使用。

本产品RNase活性未检测,不能用于反转录反应(RT-PCR)中DNA的去除使用。RT-PCRDNA污染的去除请选择RNase-free DNase I

 

产品组成:

产品名称

规格

保存条件

DNase I粉末

10 KU

-20

DNase I溶解液

5ml

-20

1M MgCl2

5ml

-20

 

活性定义:

One unit of the enzyme completely degrades 1μg of DNA in 10 min at37°C. 

 

DNaseI溶解液组份:

20mM sodium acetate pH 6.5, containing 5mM CaCl2 and 0.1 PMSF, 50% (v/v) glycerol.

 

DNaseI失活或抑制:

加入EDTA至终浓度为2.5mM后,65℃加热10分钟可使DNase I失活。酚氯仿抽提也可以使DNase I失活。金属离子螯合剂,达到毫摩尔/升浓度的锌离子,0.1%SDSDTT、巯基乙醇等还原剂,50-100mM以上盐浓度均对DNase I有显著抑制作用。

 

使用方法:

1. DNase I溶液的配制:取5ml DNase I溶解液全部加到DNase I粉末中,充分混匀,配成浓度为2000U/ml DNase I溶液。-20℃贮存。

2. 蛋白提取液中按照1/100体积加入DNase I溶液(使其终浓度为20U/ml),1/100体积加入1MMgCl237℃处理30-60分钟。

注:由于EDTA能螯合酶活性需要的Ca2+Mg2+,蛋白初始裂解液中要去除EDTA,否则会降低DNase的消化能力。

3. 继续后续蛋白提取实验。

 

保存:-20℃粉末未配制有效期3年;DNaseI配制成溶液后-20℃有效期一年。

 

DNase Ⅰ(蛋白提取用)

产品货号:T11190

 

产品规格:10KU

 

产品简介:

脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNaseⅠ)是一种非特异性核酸酶切酶,可用于降解单链或双链DNA,其原理为DNaseⅠ水解磷酸二酯键产生带有5'-磷酸基团和3'-OH的单核苷酸或寡核苷酸本产品能迅速水解核酸,降低粘度以减少处理时间和增加蛋白产量。该酶可以与细菌蛋白提取液和RIPA裂解液等蛋白抽提试剂配合使用。

本产品RNase活性未检测,不能用于反转录反应(RT-PCR)中DNA的去除使用。RT-PCRDNA污染的去除请选择RNase-free DNase I

 

产品组成:

产品名称

规格

保存条件

DNase I粉末

10 KU

-20

DNase I溶解液

5ml

-20

1M MgCl2

5ml

-20

 

活性定义:

One unit of the enzyme completely degrades 1μg of DNA in 10 min at37°C. 

 

DNaseI溶解液组份:

20mM sodium acetate pH 6.5, containing 5mM CaCl2 and 0.1 PMSF, 50% (v/v) glycerol.

 

DNaseI失活或抑制:

加入EDTA至终浓度为2.5mM后,65℃加热10分钟可使DNase I失活。酚氯仿抽提也可以使DNase I失活。金属离子螯合剂,达到毫摩尔/升浓度的锌离子,0.1%SDSDTT、巯基乙醇等还原剂,50-100mM以上盐浓度均对DNase I有显著抑制作用。

 

使用方法:

1. DNase I溶液的配制:取5ml DNase I溶解液全部加到DNase I粉末中,充分混匀,配成浓度为2000U/ml DNase I溶液。-20℃贮存。

2. 蛋白提取液中按照1/100体积加入DNase I溶液(使其终浓度为20U/ml),1/100体积加入1MMgCl237℃处理30-60分钟。

注:由于EDTA能螯合酶活性需要的Ca2+Mg2+,蛋白初始裂解液中要去除EDTA,否则会降低DNase的消化能力。

3. 继续后续蛋白提取实验。

 

保存:-20℃粉末未配制有效期3年;DNaseI配制成溶液后-20℃有效期一年。

 


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