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血清和血浆制备方法说明

来源:上海远慕生物科技有限公司   2024年04月18日 10:08  

  血清和血浆均是不含细胞(包括血小板)等有形成分的血液液体部分,其主要区别是血清不含凝血因子和血小板,血浆则含有凝血因子,它们的制备方法如下:

  1、血清的制备:获得的血液不能抗凝,盛于离心管或可以离心的器皿中,静置或置37℃环境中促其凝固,待血液凝固后,将其平衡后离心(一般为3000rpm,离心 5~10min),得到的上清液即为血清,可小心将上清吸出(注意切勿吸出细胞成分),分装备用。

  2、血浆制备:在盛血的容器中先加人一定比例的抗凝剂(抗凝剂:血液 = 1:9,将血液加到一定量后颠倒混匀,离心(离心条件同上)后所得的上清液即为血浆。初用者最好将上清移至另一清洁容器,吸出血浆时用毛细吸管贴着液面逐渐往下吸,切忌不能吸起细胞成分。

  3、富含血小板血浆制备:将获得的血液经800rpm,离心5min,其上清即为富含血小板血浆。

  血浆与血清区别

  血清

  血液凝固析出的淡黄色透明液体。如将血液自血管内抽出,放入试管中,不加抗凝剂,则凝血反应被激活,血液迅速凝固,形成胶冻。凝血收缩,其周围所析出之淡黄色透明液体即为血清,也可于凝血后经离心取得。在凝血过程中,纤维蛋白原转变成纤维蛋白块,所以血清中无纤维蛋白原,这一点是与血浆最大的区别。而在凝血反应中,血小板释放出许多物质,各凝血因子也都发生了变化。这些成分都留在血清中并继续发生变化,如凝血酶原变成凝血酶,并随血清存放时间逐渐减少以至消失。这些也都是与血浆区别之处。但大量未参加凝血反应的物质则与血浆基本相同。为避免抗凝剂的干扰,血液中许多化学成分的分析,都以血清为样品。

  血浆

  相当于结缔组织的细胞间质。是血液的重要组成分,呈淡黄色液体(因含有胆红素)。血浆的化学成分中,水分占90~92%,溶质以血浆蛋白为主。血浆蛋白是多种蛋白质的总称,用盐析法可将其分为白蛋白、球蛋白和纤维蛋白原三类。血浆蛋白质的功能有:维持血浆胶体渗透压;组成血液缓冲体系,参与维持血液酸碱平衡;运输营养和代谢物质,血浆蛋白质为亲水胶体,许多难溶于水的物质与其结合变为易溶于水的物质;营养功能,血浆蛋白分解产生的氨基酸,可用于合成组织蛋白质或氧化分解供应能量;参与凝血和免疫作用。血浆的无机盐主要以离子状态存在,正负离子总量相等,保持电中性。这些离子在维持血浆晶体渗透压、酸碱平衡、以及神经-肌肉的正常兴奋性等方面起着重要作用。血浆的各种化学成分常在一定范围内不断地变动,其中以葡萄糖、蛋白质、脂肪和激素等的浓度最易受营养状况和机体活动情况的影响,而无机盐浓度的变动范围较小。血浆的理化特性相对恒定是内环境稳态的首要表现。

  血清与血浆的区别,主要在于血清不含纤维蛋白原,纤维蛋白原能转换成纤维蛋白,具有凝血作用

  药动实验大部分情况下用血浆,一般血浆药物浓度能反映药物的分布情况,也比血清量多一些。药代动力学不仅仅是做血中的药物浓度,还要做血浆蛋白结合率。药物代谢动力学研究,主要测血浆中的药物浓度,但是如果血浆中中含有的抗凝剂影响药物浓度的测定,就应使用血清样品。

  血浆的制备:将采取的血浆置含抗凝剂(如:肝素、草酸盐、枸橼酸盐、EDTA、氟化钠等)试管中,混合后,2500~3000rpm离心5min,取上清液即为血浆。

  血清的制备:将采取的血浆在室温下至少放置30min到1h,待凝结出血饼后,用细竹棒或玻璃棒轻轻拨去血饼,然后以2500~3000rpm离心5-10min,取上清液,即为血清。

  血浆、血清、全血的优缺点

  血浆与血清中的药物测定值通常是相同的,而且血成分更能接近于组织液,测定血浆与血清中药物浓度比全血更能反映机体的具体情况

  优点 缺点

  血浆 处理速度快,分离速度快, 获取量大; 不如血清干净

  血清 干净,更具有代表性; 获取量小,处理时间长

  当药物与红细胞结合,而且动力学行为与在血浆中不同,须采全血进行研究。

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