Vero细胞系的建立可以追溯到1962年,起源于非洲绿猴的肾上皮细胞。
Vero细胞克隆及其性质
Vero E6细胞系:
该克隆也称为Vero C1008,来自Vero 76细胞,1979年由P.J. Price在微量滴定板上使用稀释技术分离。 Vero E6细胞特别适合培养复制缓慢的病毒。 Vero 76细胞:
这些细胞起源于1968年的一只非洲绿猴的肾脏,保持了Vero细胞的上皮形态特征。
培养猴细胞系Vero细胞需要熟悉特定的参数,如倍增时间、接种密度和合适的生长培养基。
人口倍增时间:
Vero细胞的倍增时间约为24小时。 坚持性:
Vero细胞粘附在表面上,培养时通常形成单层。 播种密度:
建议从1倍10^4 cells/cm^2.的播种密度开始为了培养粘附的Vero细胞,用PBS清洗它们并用Accutase处理它们以分离它们。分离后,离心细胞,将其重新悬浮在新鲜培养基中,并将其转移到新的培养瓶中。 生长培养基:
哈姆的F12和DMEM都是培养Vero细胞的合适培养基。这些应补充2.5mM L-谷氨酰胺和5%胎牛血清(FBS)以支持最佳生长。培养基应该每周更新两到三次。 生长条件:
Vero细胞在37°C的温度和5% CO2的潮湿环境中生长旺盛。 存储:
对于长期储存,Vero电池应保持在低于-150°C的温度下,要么放在超低温冰箱中,要么放在液氮的蒸汽相中。 冷冻过程和介质:
对于冷冻保存,使用CM-1或CM-ACF或含有FBS和DMSO的生长培养基作为冷冻培养基。采用缓慢冷冻技术,每分钟逐渐降低1°C的温度。 解冻过程:
将容器浸入37°C水浴中并轻轻搅动40-60秒,解冻Vero细胞。然后,在新鲜培养基中稀释细胞,离心去除冷冻保护剂,重新悬浮在新鲜生长培养基中,并将其置于新的烧瓶中以恢复和生长。 生物安全等级:
Vero细胞应在符合1级生物安全要求的实验室中处理。
Vero细胞系在研究中的应用
病毒研究和疫苗生产中的Vero细胞
Vero细胞在组织工程和上游生物过程开发中的作用
Vero细胞在药物疗效和安全性测试中的应用
Vero细胞的局限性
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