Lucerna, Inc. 是一家生物技术工具公司，专注于开发和商业化荧光适体 (Spinach?) 技术，其目的是：1.) 提供即插即用的 RNA 成像和检测系统作为研究试剂，2.) 开发高- 通量筛选平台，以实现以前难以处理的目标的新药物发现，以及 3.) 开发用于工业生产应用的荧光传感器。

lucernatechnologies 200-100说明书

Cyclic-di-GMP Assay

用于测量细胞中环二鸟苷酸 (c-di-GMP) 水平的均质荧光测定。

检测说明

环二鸟苷单磷酸 (c-di-GMP) 检测是一种简单的混合读取、高选择性、HTS 就绪检测，用于测量细胞中的 c-di-GMP 水平。这种均相测定可用于检测任何产生 c-di-GMP 的生化或酶促反应中的 c-di-GMP，或用于监测细胞内 c-di-GMP 浓度的细胞应用。

测定原理

荧光信号的演变取决于 c-di-GMP 与传感器中 c-di-GMP 核糖开关的初始结合。这导致菠菜TM适体的稳定，进而结合 DFHBI-1T 以产生荧光。可以使用 GFP/FITC 滤光片组或 482nm 激发和 505nm 发射来测量荧光。

便于使用

c-di-GMP 检测易于使用且均质。只需将您的样品与提供的检测试剂一起孵育 30 分钟，然后在带有 FITC/GFP 滤光片或激发波长 482nm 和发射波长 505nm 的荧光读板机上读取样品。

快速响应和良好的信号稳定性

c-di-GMP 传感器在检测 c-di-GMP 时会迅速产生信号，因此可以进行快速测量。荧光信号随着时间的推移是稳定的，因此允许样品的批处理模式。早在测定设置的 30 分钟即可获得出色的 HTS 参数，并在很长一段时间内保持高水平。

宽动态范围

该检测即使在 50nM 的 c-di-GMP 下也很灵敏，并且具有宽广的动态范围。

选择性

c-di-GMP 传感器对 c-di-GMP 具有高度选择性，不受常见反配体的干扰。

即使与过量 500 – 1,000 倍的反配体（例如 GMP、pGpG 和 c-AMP-GMP）相比，该测定也实现了出色的 HTS 测定参数（Z 因子 >0.9）。

与基于细胞的检测的兼容性

c-di-GMP 测定可用于以均质形式测量细菌中的细胞内 c-di-GMP 浓度，无需造粒、裂解或洗涤步骤。只需用 BC 试剂补充含有细菌培养物的测定缓冲液，添加传感器和荧光团，孵育 30 分钟，然后在荧光阅读器上读取。

?细菌中的 c-di-GMP 估计

表达野生型 WspR（来自铜绿 假单胞菌的二鸟苷酸环化酶）的大肠杆菌细胞用呋喃西林（抗生素）、二甲基甲酰胺/DMF（载体）处理或不处理（对照）。此外，还以不同的细胞密度接种细菌以模拟不同的 c-di-GMP 水平。在 96 孔板中生长的细菌细胞中的 Cyclic-di-GMP 浓度在没有任何沉淀、洗涤、裂解或有机提取的情况下进行测量。

c-di-GMP 测定显示细菌中 c-di-GMP 浓度的变化，以响应抗生素处理和不同细菌细胞密度。

该产品被引用于：

凝聚素通过控制表型程序对铜绿假单胞菌角膜毒力至关重要。赵和等。生物Rxiv。2021。