食品安全新标准下皖仪科技液相色谱法对食品中维生素D的检测方案

前言

《GB 5009. 296-2023食品安全国家标准食品中维生素D的测定》于2023年实施，该标准代替《GB 5009.82-2016食品安全国家标准食品中维生素A、D、E的测定》中第三法“食品中维生素D的测定液相色谱串联质谱法”和第四法“食品中维生素D的测定高效液相色谱法”，增加了在线柱切换反相液相色谱法，使维生素D的检测效率得到了显著的提高。

关键词：二维液相色谱；紫外检测器；维生素；在线柱切换。

1 实验方法

1.1   仪器配置

皖仪科技LC3300系列高效液相色谱仪

表1高效液相色谱系统配置清单

1.２ 测定方法

本方案采用C8，4.6x150mm，5μm作为一维色谱柱，多环芳烃(PAH)C18，4.6x150ｍｍ，3μm作为二维色谱柱以及C18，4.6x50mm，5μm富集柱，建立了在线柱切换-反相液相色谱测定食品中维生素的方法，实现了食品中维生素A、D2、D3和维生素E的有效分离，并通过实际测试，确定该方法稳定可靠。

采用中心切割法实现维生素A、维生素D及维生素E的分析。该方案分析包含三个阶段（见图1）：

图1 中心切割法同时分析VA、VD与四种VE的阀切示意图

２ 实验结果

２.1 系统适用性

图2 维生素A、E标准品一维检测色谱图

表２ 维生素A、E标准品一维检测色谱参数表

图3 维生素D2、D3标准品二维检测色谱图

表3 维生素D2、D3标准品二维检测色谱参数表

分析：VA和VE在第一维均能实现基线分离，VD2、VD3在第二维实现基线分离（VD2和VD3分离度为3.188）。

２.２ 重复性

图4 维生素A、E标准品一维检测色谱重叠图

图5 维生素D2、D3标准品二维检测色谱重叠图

分析：维生素A、D2、D3、E标准品连续进样8次，重复性较好，保留时间的RSD在0.05%~0.2%之间，峰面积的RSD在0.1%~0.6%之间，结果表明该方法在连续进样时重复性良好。

３ 结论

本文根据《GB 5009. 296-2023食品安全国家标准食品中维生素D的测定》，使用皖仪科技LC3300系列在线柱切换—二维高效液相色谱仪搭配双高压泵与双紫外检测器进行检测，建立了快速测定维生素A、D、E的方法，一次进样就实现了VA、VD及VE的分析测定，经实验验证，该方案灵敏度高、专属性强，可供相关人员参考。同时，皖仪科技也可提供二维液相色谱技术检测维生素的完整解决方案，欢迎咨询。（注意事项：1. 常见的维生素有在光照下氧化的问题，需避光保存；2. 标准系列溶液现用现配。）