皖仪科技液相色谱配置示差检测器测试食品里多种糖类物质

摘要：本篇文章参考了GB5009.8-2016标准，采用皖仪科技高效液相色谱仪LC3200系列配置示差检测器测试果糖、葡萄糖、麦芽糖等糖类物质。

        皖仪科技LC3200系列高效液相色谱仪

1 前言

糖类是自然界中最多的有机化合物，是食品中重要的风味成分和营养成分，其种类和含量是评价食品品质的重要质量指标。在食品加工工艺中，糖类对改变食品的形态、组织结构、物化性质以及色、香、味等感官指标起着十分重要的作用。因此，准确测定食品中各种糖的含量对食品品质改良、加工储藏技术选择、新产品开发等都具有重要意义。

随着检测技术的蓬勃发展，越来越多的检测手段被运用到糖类检测中，而高效液相色谱法因其高效、高灵敏度、重复性好等优点，被广泛用于产品中多种糖含量的测定。

2 方法原理

高效液相色谱—示差检测器测定，外标法定量。

3 仪器配置及实验方法

3.1 仪器配置

       表1 皖仪科技液相配置清单表

3.2 实验方法

3.2.1 试剂和标准品制备

         表2 试剂及标准品清单

3.2.1.1 糖标准贮备液:分别称取经过96℃±2℃干燥2h的果糖、葡萄糖、麦芽糖各适量,用流动相定容于50mL,置于4℃密封可贮藏一个月。

3.2.1.2 果糖标准使用液:分别吸取果糖标准贮备液适量,分别用流动相稀释为浓度6.8mg/L、34mg/L、68mg/L、340mg/L、680mg/L浓度标准溶液。

3.2.1.3 葡萄糖标准使用液:分别吸取葡萄糖标准贮备液适量,分别用流动相稀释为浓度64mg/L、320mg/L、640mg/L、3200mg/L、6400mg/L浓度标准溶液。

3.2.1.4 麦芽糖标准使用液:分别吸取麦芽糖标准贮备液适量,分别用流动相稀释为浓度9mg/L、45mg/L、90mg/L、450mg/L、900mg/L浓度标准溶液。

3.2.2 色谱条件表3 色谱条件

3.3 样品前处理

称取糖浆样品适量于50mL容量瓶,加流动相（注意:因为示差检测器原理是利用溶液的折射率不同进行检测，所以示差检测器对溶液非常敏感。在样品及标准品配制时需用流动相配制，洗针液也用流动相。且做实验之前流动相要预混。）定容至50mL,充分摇匀,用干燥滤纸过滤,弃去初滤液,后续滤液用0.45μm微孔滤膜过滤或离心获取上清液过0.45μm微孔滤膜至样品瓶,供液相色谱分析。

4 实验结果

4.1 线性

          图1果糖标准曲线

          图2葡萄糖标准曲线

          图3麦芽糖标准曲线

说明：由上图可知，果糖、葡萄糖、麦芽糖的曲线方程与R值分别为：y=13108x-0.1398，R值：0.99978y=0.10211x-3.15229，R值：0.99997y=0.05504x-0.54839，R值：0.99994，完全满足实验要求。

4.2 重复性

4.2.1 果糖重复性

          图4果糖重复性谱图

         表4 果糖重复性数据

4.2.2 葡萄糖重复性

         图5葡萄糖重复性谱图

         表5 葡萄糖重复性数据

4.2.3 麦芽糖重复性

          图6麦芽糖重复性谱图

          表6 麦芽糖重复性数据

说明：根据以上表格数据可知，果糖、葡萄糖、麦芽糖的保留时间RSD分别为：0.209%、0.052%、0.213%。峰面积RSD分为：0.886%、0.389%、0.983%。重复性良好。满足一般实验要求。

4.3某品牌糖浆测试结果

         图7混标标准品测试谱图

          图8糖浆-1实验谱图

     图9糖浆-2实验谱图表7样品实验数据 

说明：样品的峰型良好，分离度均大于1.6以上，满足标准要求1.5。且经计算，果糖、葡萄糖、麦芽糖两次独立测定结果的绝对差值占其算数平均值的结果分别为6.6%、7.9%、7.7%。满足标准要求的10%。

5 总结

本篇介绍的分析方法，采用皖仪科技高效液相色谱仪LC3200系列配置示差检测器测试果糖、葡萄糖、麦芽糖等糖类物质。实验结果显示，果糖、葡萄糖、麦芽糖线性良好，R值均在0.999以上，保留时间RSD分别为0.209%、0.052%、0.213%，峰面积RSD分为0.886%、0.389%、0.983%，重复性良好，满足一般实验要求。样品测试的峰型良好，分离度均大于1.6以上，满足标准要求1.5。且经计算，果糖、葡萄糖、麦芽糖两次独立测定结果的绝对差值占其算数平均值的结果分别为6.6%、7.9%、7.7%，满足标准要求的10%。说明皖仪科技LC3200系列高效液相色谱仪满足测试果糖、葡萄糖、麦芽糖等糖类物质的实验要求。