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原代细胞(primary culture cell)是指从机体取出后立即培养的细胞。有人把培养的*1代细胞与传10代以内的细胞统称为原代细胞培养。原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究，如蛋白质组学、基因组学、细胞株(系)研究、DNA，RNA和遗传学研究等，还可应用于生物医药产业如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等。
原代细胞的培养是指直接从机体取下细胞、组织和器官后立即进行培养。因此，较为严格地说是指成功传代之前的培养，此时的细胞保持原有细胞的基本性质，如果是正常细胞，仍然保留二倍体数。但实际上，通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。
适当分离的原代细胞应具有低传代和稳定性，具有高活力、转染效率和加倍。分离后，这些细胞可以被膨胀、冷冻、记录和测试。研究人员可以从许多人类和动物细胞类型中进行选择，有不同的大小和包装配置，包括新鲜分离、培养、增殖或低温保存的细胞。冻存管、微孔板、烧瓶或易于使用的总试剂盒提供了进一步的选择。组织和细胞也可以从同一供体中匹配地分离出来。
原代细胞与体内原组织在形态结构和功能活动上相似性大。由于培养的细胞刚刚从活体组织分离出来，故更接近于生物体内的生活状态。这一方法可为研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的手段。同时也为以后传代培养创造条件。
原代培养的过程指动物的组织或器官从机体取出后，经机械法或各种酶类(常用胰蛋白酶)和鳌合剂(常用EDTA)处理，使之分散成单个细胞，加入适量培养基，置于合适的培养容器中，在无菌、适当温度和一定条件下，使之生存、生长和繁殖的过程。
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