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为什么荧光显微镜能观察到荧光,用LUYOR-3415RG观测看不到?

来源:上海路阳仪器有限公司   2024年01月10日 15:10  

1.为什么荧光显微镜能观察到荧光,用LUYOR-3415RG观测看不到?

因为有些植入的荧光蛋白不是整体表达,只是局部表达,表达的面积太小,人的肉眼无法识别,而荧光显微镜是在放大几十倍甚至上百倍观察的效果。

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2.为什么按照LUYOR-3415说明书操作却看不到荧光的表达

 原因是GFP激发光源没有选择正确,比如载体标注的荧光蛋白应该在488nm下激发出荧光,但是却选择了540nm或者365nm的激发光源去激发荧光蛋白,这种情况是看不到荧光蛋白的。可以根据LUYOR-3415 GFP激发光源介绍或者联系客服小姐姐进行咨询再选择。

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 3.为什么波段选择是正确的还看不到荧光表达?

除了表达量少以外,很有可能是实验的操作失误,导致实验失败,因此看不到荧光,可以选择其他的阳性质粒进行检测仪器效果。

4.为什么说载体表达量低会导致看不到荧光蛋白?是不是表达量低的荧光蛋白都会看不见荧光?

大家都知道肉眼的可视范围是有限的,比如只能看见篮球大小的物体,这时我们的载体表达量只有乒乓球大小就会导致看不见。并不是的表达量低都看不见荧光表达,只有低于人眼可视范围的表达量才会导致看不见荧光的表达。这时可以借助普通的显微镜加上LUYOR-3415组合成荧光显微镜进行观察。

5.LUYOR-3415RG如何切换光源?

切换光源可在仪器头部后方圆形按钮处,轻轻按下按钮即可轻松切换光源

 6.植入到叶片的荧光蛋白为什么无法观察到?

因刚刚植入进去不久,表达位置太小,肉眼无法识别。特别是在组培繁殖研究经常遇到此问题。

7.用LUYOR-3415荧光蛋白观测镜无法分选含有GFP的种子

因为一般种子表皮都有坚硬的外壳,很多种子外壳上没有表达GFP,隔着外壳很难去分选种子。

8.为什么老鼠早期可以看到荧光蛋白后期就很难看得到?

刚出生的转基因老鼠皮肤比较薄,毛发少,很容易观察到GFP,在生长一段时间在表皮就很难看得到。 

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 9.观察到的GFP效果如何拍照?

如果用单反相机拍照,请购买专用的拍照滤镜,把相机调试到合适的拍照模式(不同品牌的相机拍照模式不一样),我公司提供62mm的单反相机专用拍照滤镜,可以单独购买。

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 10.购买的62mm相机滤镜和照相机不配套怎么办?

请先识别自己相机镜头尺寸,正视相机前端,上面一般会标识XXmm,例如:58mm,67mm等,如果是58mm的镜头,请购买62转58mm的转换卡,通过转换卡可以将62mm的滤镜安装到58mm镜头上。我公司提供部分常规尺寸的转换卡,常规的转换卡也可以向我公司技术人员免费索取。 

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11. 路阳的荧光蛋白激发光源有什么优点?

Luyor-3415采用了双通道构造,一台即可实现多种荧光蛋白的观察,比如:GFP,RFP,YFP,CFP等,且光源照射面积广激发面积大,2x6颗大灯柱,激发出的荧光明亮,容易观察且清晰。

12.用于种子荧光蛋白筛选,用哪一个型号比较好?

如果长时间用于种子筛选,建议购买LUYOR-3415RG,这款可以用交流适配器供电也可用锂电池供电,可选配支架进行长时间工作。 

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13.路阳的荧光蛋白观测镜都有哪些用户?

中国农业大学、中山大学、南京农业大学、华中农业大学,中国农科院、中科院遗传所等,目前有100多家科研单位在使用。

14.LUYOR产品可以试用吗?

luyor荧光蛋白观测镜可以试用,试用产品为友情提供,为了让更多需要筛选的实验室研究人员了解到它,得到使用,希望大家多多爱护。

15.为什么别的厂家的荧光蛋白观察眼镜和luyor的激发光源不匹配?

我们的观察眼镜和激发光源是经过我们工程师调配好的,不仅能够阻隔掉激发光,同时又能保证发射的荧光能够更多的观察到。

16.观察眼镜可以多买吗?

因我们一种光源标配是一副眼镜,需要多配观察眼镜的请直接联系我们销售和当地代理商购买。

17.如果需要长时间使用激发光源进行实验的操作,是不是需要一直用手举着仪器?还是有什么解决方法?

可以选取3415专用支架,支架为可调支架,如果长时间用灯的话,可调支架可以解放双手。

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18.产品保修多久?
我们主机是免费保修3年,充电电池组免费保修1年。
若有其他问题需要咨询,可扫描下方二维码联系上海路阳仪器有限公司客服咨询。


多种应用

由于GFP及其易用性,GFP等荧光蛋白已成为分子生物学的主流。科学家可以很容易地利用含有GFP的质粒作为一种手段,达到许多功能目的,以下是一些常用的用途,但是目前还有许多其他的用途,并且新的GFP技术正在不断发展!

融合标记:GFP是最常见的用途之一,它可以与蛋白质的N-或C-末端融合,这使科学家能够可视化基因表达的时间和地点。

转录报告员:将GFP置于感兴趣的启动子的控制下,可以用来有效地监测特定细胞类型中启动子的基因表达。这种转录报告是GFP最早的应用之一。

Förster共振能量转移(FRET):这是用来研究两个蛋白质之间的相互作用,或在两个蛋白质域之间发生构象变化的相互作用。典型地,使用了两种具有重叠激发/发射光谱的荧光蛋白;融合到每个正在测试的蛋白质或域的一个。在这里找到微动质粒。

分裂EGFP:作为一种替代fet的方法,拆分EGFP也被用来研究蛋白质与蛋白质的相互作用。在这种情况下,EGFP的两部分融合到感兴趣的蛋白质中,当它们接近时,EGFP的两部分经历折叠、成熟和荧光。

生物传感器:采用FRET、钙调蛋白等多种策略,设计了一系列基于GFP的荧光生物传感器,用于检测各种细胞内条件,包括离子(如Ca2+)浓度和pH等。

光遗传学:科学家可以利用光来检测、测量和控制分子信号、细胞和细胞群,以了解它们的活动,并可视化改变对这种活动的影响。了解更多关于光遗传学的开放式光遗传学,并在Addgene找到光致执行器和传感器。

细胞标记/选择:表达结构如质粒通常包括GFP作为标记,以帮助识别哪些细胞成功地获得了质粒。这可以作为选择抗生素的替代品。这种类型的质粒可能在感兴趣基因的附加启动子的控制下,或与感兴趣基因相同的转录子表达GFP,但在内部核糖体进入位点(IRES)之后。


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