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有哪些技术可以在细胞中直接检测RNA?

来源:红荣微再(上海)生物工程技术有限公司   2023年12月28日 10:51  

可以直接用于细胞中检测RNA的实验技术有很多,这些技术也各有优缺点,应根据具体的研究需求选择最合适的技术:

  • RNA荧光原位杂交技术技术(RNA-FISH)的原理基于探针与靶序列的特异性结合。首先,研究人员会设计出与目标RNA序列互补的荧光探针。这些探针在杂交缓冲液中与细胞中的目标RNA结合,形成探针-靶RNA复合物。然后,通过洗涤步骤去除未结合的探针,最后用荧光显微镜观察杂交信号的位置和数量。RNA-FISH的实验流程包括样品制备、杂交、洗涤及分析等步骤。首先,研究人员需要准备样品,这通常涉及将组织或细胞固定在载玻片上,并进行适当的预处理以暴露出RNA。然后,将探针与样品杂交,这一步骤需要控制温度和湿度以确保探针与目标RNA的有效结合。接下来是洗涤步骤,目的是去除未结合的探针,最后对样品进行荧光显微镜观察和分析。

  • 聚合酶链反应(PCR):这是一种高通量、高灵敏、可重复性高的分子生物学技术,可以快速精确检测感兴趣的基因片段,用于检测基因的有无以及变异的存在。

  • Northern Blotting:这是一种传统的RNA分析方法,可用于检测特定RNA分子的大小和丰度。它可用于确定已知基因的转录起始位点、转录结束位点以及转录产物的处理情况。

  • 反转录-聚合酶链反应(RT-PCR):这是一种常用的RNA定量方法,它首先通过反转录将RNA转化为cDNA,然后使用PCR进行扩增。RT-PCR可以用于检测和定量特定基因的表达水平。

  • 核糖体展示(Ribosome Display):这是一种用于筛选蛋白质的方法,通过将目标蛋白质与核糖体结合,然后进行翻译和展示。该技术可以用于筛选具有特定功能的蛋白质或检测细胞中表达的特定RNA。

  • 细胞内原位杂交(In Situ Hybridization):这是一种用于检测细胞内特定RNA的技术,通过使用标记的探针与目标RNA杂交,然后通过显微镜观察杂交信号的位置和数量。


红荣微再专注于分子诊断领域,早期技术团队包含多名国内大学生物与遗传学科博士,从多样本核酸提取保存技术、自主研发缓冲体系、抑制非特异性扩增技术逐步完成了红荣微再PCR实验方案,实现PCR扩增效率以及检测灵敏度的重大突破,也奠定了红荣微再以技术为根本,客户为导向的研发模式,建立以创新为驱动的技术发展平台。

2019年以来,经历社会、市场的多种变化革新,红荣微再公司内部也应运完成组织架构更新与产业布局的调整。公司确立“RNA、NGS、ctDNA、qPCR”四大方向并齐发展模式,技术部门新设NIPT、伴随诊断、肿瘤早筛、传染病监测、实验自动化设备等相关团队,组织海外留学博士、高新技术企业核心骨干完成新产品线的研发工作,面对快速增长的市场下游需求,红荣微再已初步完成多线产品的核心研发与标准化生产,主要包括核酸提取试剂盒、qPCR试剂盒、测序试剂盒以及分子诊断类产品的基础仪器耗材等多个类别。


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