BL-B01D1由一种针对EGFR/HER3的四价双特异性抗体（SI-B001）、一种组织蛋白酶B可切割连接子和一种新型拓扑异构酶1抑制剂（Ed-04）组成，后者是生物碱喜树碱的衍生物，可驱动细胞周期阻滞在S期和随后的凋亡。

EGFR是治疗非小细胞肺癌的著名靶点，目前针对其的小分子抑制剂已经开发到第四代，并没有彻底解决耐药性问题。如果一个不行就再一个HER3形成双特异抗体，HER3优先与EGFR或HER2二聚，诱导受体对的构象变化和一系列磷酸化事件，诱导信号级联的激活，促进细胞存活和增殖。EGFR/HER3这两个靶点在实体瘤中发生率较高，可覆盖更多人群。这种双特异抗体是非常精确的导弹，然后再加一个弹药——一个小分子药物做成ADC！

BL-B01D1来源于SI-B001四价双特异性抗体，SI-B001又称为SI-1X6.4，专利CN116490523A描述了采用Octet® 非标记分子互作系统高通量的分析与准确的表征SI-1X6.4的结合活性。双抗的设计与结合活性的选择取决于靶点的性质，以及要想呈现怎么样的需求，以此设计合适的双抗结构来开发ADC。

SI-1X6.4与EGFR结合具有高亲和力（KD=5.38nM），而与HER3的结合为低亲和力(KD=117nM)。由于许多肿瘤细胞中过度表达EGFR或HER2而非HER3，因此与HER3较低的亲和力，可预见的益处是允许SI-1X6.4仅在EGFR阳性肿瘤细胞上而非在HER3阳性正常细胞上与HER3结合，同时结合EGFR和HER3的协同效应的优点。因此，在该双抗的设计和分子选择上，需要重点评估不同结构域的亲和力。

图2. 在公开的专利中，最前面几条提到对靶点亲和力的调控

SI‑1X6.4，包含与西妥昔单抗相同的抗EGFR结合结构域，并且显示亲和力KD值的差异，但维持较高的亲和力(表1a)。SI‑1X6.4包含与MM‑111相同的抗HER3结合结构域，但是显著了降低了与HER3的亲和力(表1a)。

表1a. TAA结合结构域的KD值，在不同的治疗性抗体中可以不同

 

图3. Octet®检测不同候选产物（SI‑1X6.4）与EGFR的亲和力，发现亲和力较高

 

 

图4. Octet®检测不同候选产物（SI‑1X6.4）与HER3的亲和力，发现亲和力较低

 

除了亲和力检测，研究还通过Octet®验证了SI‑1X6.4可以同时结合HER3和EGFR，从而可能发挥双特异性抗体1+1＞2的功效。采用AHC传感器捕获SI‑1X6.4，依次结合EGFR抗原与HER3抗原。

Octet®检测结果意味着BL-B01D1一端与抗原结合后并不影响任何一端抗原的结合，细胞实验的结果也显示BL-B01D1相对亲本抗体具有更好的抗肿瘤活性，在某些共同表达两个靶点的癌细胞上还有更优效果。

图6. 细胞学实验表明，相对于亲本的EFGR的ADC，BL-B01D1显示出更好的对肿瘤细胞的杀伤作用

在SystImmune中，SystImmune首席执行官朱义博士表示：

“近期BL-B01D1的临床试验表明，该药物在已接受治疗的多种实体瘤患者中展现出广泛的抗肿瘤潜力，同时具有可管理的安全性特征，我们长期以来一直钦佩百时美施贵宝在肿瘤领域的研发、创新和商业化能力。这次战略合作是向全球患者提供潜在抗肿瘤药物的重要一步。我们期待着积极和富有成果的合作。”