细胞培养程序_化工仪器网

欢迎联系我

有什么可以帮您？在线咨询

细胞培养程序

来源：天津市欧诺仪器仪表有限公司 2011年12月17日 16:51

一、细胞培养程序：

A、目的：将培养于培养箱中的细胞进行继代培养，或是因应实验需求进行分盘。

B、操作程序：

1、实行注意事项 H 中操作前的准备步骤。

2、将 Flask 自培养箱中取出，于操作台中用帮浦及巴斯特滴管抽去所有溶液。

3、用滴管吸取 10 ml PBS 溶液，加入至 Flask 中，以轻微摇晃的方式润洗细胞层，之后用相同一支滴管将 PBS 溶液吸取至一干净烧杯回收废溶液。

4、拿取一只新滴管，重复步骤 3。（步骤3、4是为去除原有培养基当中的 FBS，以免 FBS 中和酵素的作用，使细胞壁上的黏附蛋白质无法被酵素分解，细胞会无法悬浮起来，无法取出细胞）

5、用一滴管吸取 2 ml 酵素溶液，加入至 Flask 当中，放入培养箱中培养 5-10分钟。

6、用滴管加入 8 ml 新鲜培养基于 Flask 中，混合均匀后可用同一支滴管取出所有溶液，置于一干净离心管。

7、将离心管放置于离心机中，以 1500 rpm 离心 5 分钟。

8、于生物操作柜中，以帮浦与巴斯特滴管抽去上方残余溶液。

9、此时视分盘状况需要，加入适量的培养基，以滴管吸放的方式将沉淀的细胞重新悬浮起来，将全数溶液平均分配至分盘的容器当中。（需计算此时在每个容器当中的量有多少）

10、补充培养基至容器的合适容量。（注意事项 B）

11、放入培养箱中继续培养或是进行实验。至此完成细胞培养的程序。

凡本网注明“来源：化工仪器网”的所有作品，均为浙江兴旺宝明通网络有限公司-化工仪器网合法拥有版权或有权使用的作品，未经本网授权不得转载、摘编或利用其它方式使用上述作品。已经本网授权使用作品的，应在授权范围内使用，并注明“来源：化工仪器网”。违反上述声明者，本网将追究其相关法律责任。
本网转载并注明自其他来源（非化工仪器网）的作品，目的在于传递更多信息，并不代表本网赞同其观点和对其真实性负责，不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时，必须保留本网注明的作品第一来源，并自负版权等法律责任。
如涉及作品内容、版权等问题，请在作品发表之日起一周内与本网联系，否则视为放弃相关权利。