倒置荧光显微镜使用常见问题和解决方法介绍

倒置荧光显微镜是细胞培养、细胞转染和很多生物研究中常用的仪器，相比共聚焦显微镜，倒置荧光显微镜的成像精度虽然稍低，但仪器更普及，更容易买到或者约到，而且使用维护都更简单点。今天我们就给大家分享下倒置荧光显微镜使用可能遇到的常见问题，以及可能的解决办法。

什么是倒置荧光显微镜

倒置荧光显微镜由倒置显微镜和落射荧光模块组成，倒置显微镜是相对正置显微镜的概念，其物镜、照明系统相对样品的位置是颠倒的；落射荧光模块是荧光观察的核心部件，有转盘式荧光模块和集成荧光模块两种，转盘式后期可升级，但需要独立的荧光光源灯箱，用转盘式模块的倒置荧光显微镜更大、更重、更贵。

为什么要用倒置荧光显微镜

倒置荧光显微镜通常Z高只会配40X物镜，因此放大倍率、分辨率不如正置荧光显微镜，但胜在应用层面更方便好用。

一是、倒置荧光显微镜的物镜有更长工具距离，可以适配各种培养皿从底部直接成像，从而节省了反复制样做玻片的麻烦，效率更高更适合大批量、多视野培养细胞等样品的观察。

二是、倒置荧光显微镜可以无沾染观察，无沾染意思是因为观察无需打开培养皿，可避免取样制样带来的沾染污染风险。

三是、倒置荧光显微镜的优势是更大的工作空间，因为倒置荧光显微的明场照明系统采用的是长工作距离聚光镜，因此载物台上方有更大空间，更方便安装使用显微操作系统等配件。

倒置荧光显微镜通常可以实现明场、相衬和荧光观察，如果仪器附近有贴SOP或者说明书，可以看看，快速上手。明场观察很简单，可以看病理切片等样品，这里不赘述；相衬观察需要切换到相衬物镜，然后把上光源光强调高，聚光镜光阑调到PHP位置（最大位置），切换相衬环板到对应的位置即可；难点是荧光观察，不同倒置荧光显微镜有不同结构，大致可以分为研究级倒置荧光显微镜和新型倒置荧光显微镜两种。