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前言
猫狗粮快递被针管投毒”？最近，此网传消息引众多人关注。很快，消息被辟谣为假，让不少宠物主人松了口气。
宠物而今成为越来越多人的陪伴者，宠物用品市场也随之不断扩大，对宠物食品、宠物饲料的要求也越来越高。其中，膳食纤维对宠物肠胃功能的保护、促进作用越来越受到重视，许多宠物饲料产品将膳食纤维作为添加营养成分之一。
适当的膳食纤维含量对宠物的营养摄入具有利好作用，准确测定产品中的膳食纤维含量，可明确产品的功能性、适用性、质量等。
本方案依照国标《GB 5009.88 食品安全国家标准 食品中膳食纤维的测定》，使用膳食纤维测定仪对宠物饲料中的总膳食纤维含量进行测定。
仪器
DF06膳食纤维测定仪，SOX606索氏提取仪，K1100全自动凯氏定氮仪，分析天平等。
实验过程
仪器准备
1、将滤膜编号，于105℃烘箱中烘干至恒重并称重为MG后，安装于过滤漏斗中，并安装至仪器相应位置处。
2、移取350 μL的热稳定淀粉酶溶液，溶于盛有50 mL的MES-TRIS缓冲液的酶瓶中；移取3.5 mL的10 mg/mL蛋白酶溶液，溶于盛有47 mL的MES-TRIS缓冲液的酶瓶中；移取700 μL的葡萄糖苷酶溶液，溶解于盛有50 mL的MES-TRIS缓冲液的酶瓶中，然后将酶瓶安装至仪器相应位置处。
3、将酶解袋装于仪器相应位置处。
样品制备
精确称取混匀后的样品10~12 g（精确至0.1 mg）左右，记为MC。将称好的样品转移至滤纸筒中。将盛有样品的滤纸筒置于仪器萃取室内，向溶剂杯中加入沸程30~60℃的石油醚，仪器参数设置如下：
萃取模式 | 萃取时间 | 萃取温度 | 试剂添加量 | 预干燥时间 |
索氏标准 | 270 min | 65℃ | 100 mL | 30 min |
抽提完成后，将残渣烘干至恒重，记为mD。
总膳食纤维测定
准确称取样品1.0 g（精确至0.1 mg），记为M，并转移置酶解袋中。设定酶解程序如下：
酶解 | 时间/min | 温度/℃ |
淀粉酶酶解 | 40 | 95 |
蛋白酶酶解 | 120 | 60 |
葡萄糖苷酶酶解 | 30 | 60 |
在葡萄糖苷酶酶解开始前，用3 mol/L的醋酸溶液调节酶解液PH（60℃下）至4.5±0.2（或可先添加5 mL的3 mol/L醋酸溶液后使用1 mol/L的氢氧化钠溶液调节至该PH值）。设置沉淀及洗涤参数如下：
78%酒精沉淀添加量 | 260 mL |
沉淀时间 | 60 min |
抽滤时间 | 3600 s |
78%酒精冲洗用量 | 15 mL |
95%酒精冲洗用量 | 15 mL |
抽滤完成后，将附有残渣的滤纸取出，放置于105℃烘箱中烘干至恒重并称重为MGR。
不可溶性膳食纤维及可溶性膳食纤维测定
称样量及酶解的参数与与总膳食纤维测定方法相同，酶解结束后的洗涤参数设置如下：
抽滤时间 | 360 s |
洗涤热水用量 | 15 mL |
抽滤完成后，将附有残渣的滤纸取出，放置于105℃烘箱中烘干至恒重并称重为MGR。将洗涤后的滤液收集在布氏漏斗下方的锥形瓶中，设置沉淀及洗涤参数如下：
78%酒精沉淀添加量 | 396 mL |
沉淀时间 | 60 min |
抽滤时间 | 3600 s |
78%酒精冲洗用量 | 15 mL |
95%酒精冲洗用量 | 15 mL |
沉淀完成后，在仪器上换装另一套装有恒重好的滤膜的漏斗及烧瓶，将沉淀好的溶液摇匀并倒入新的漏斗中抽滤。抽滤完成后，将附有残渣的滤纸取出，放置于105℃烘箱中烘干至恒重并称重为MGR。
计算
每两份残渣按照国标GB 5009.5，一份计算蛋白质质量MP；另一份置于马弗炉中，于550℃下灰化3h测定灰分，计算灰分质量MA。
结果与讨论
实验结果
实验选取的宠物饲料样品经脱脂、酶解、抽滤、烘干恒重、测定蛋白和灰分后，得到实验结果如下表所示：
样品 | 称样量/g | 损失因子 | 残渣/g | 残渣蛋白质/g | 残渣灰分/g | 总膳食纤维含量/% | 均值/% | 精密度/% |
宠物饲料 | 1.0010 | 1.199 | 0.3555 | 0.1112 |
| 15.33 | 15.69 | 4.65% |
1.0122 | 0.3709 |
| 0.0652 | |||||
1.0042 | 0.3744 | 0.1181 |
| 16.06 | ||||
1.0050 | 0.3786 |
| 0.0633 | |||||
0.0000 | 0.0083 | 0.0052 |
|
| ||||
0.0000 | 0.0074 |
| 0.0009 |
结论
本次测试的宠物饲料的总膳食纤维含量为15.69%，精密度为4.65%，结果平行性良好。
参考文献
[1] GB 5009.88 食品安全国家标准 食品中膳食纤维的测定[s].
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