产品推荐:气相|液相|光谱|质谱|电化学|元素分析|水分测定仪|样品前处理|试验机|培养箱


化工仪器网>技术中心>操作使用>正文

欢迎联系我

有什么可以帮您? 在线咨询

大鼠心肌细胞培养需要注意哪些问题

来源:武汉普诺赛生命科技有限公司   2023年09月20日 18:23  
  H9c2 (2-1)大鼠心肌细胞是一株由Kimes·B和Brandt·B从BD1X大鼠胚胎心脏组织的克隆细胞株亚克隆得到的细胞株;H9c2(2-1)细胞表现出许多骨骼肌的特性。H9c2(2-1)细胞中的成肌细胞能融合形成多核的肌管,并对乙酰胆碱的刺激发生反应。如果培养基中的血清浓度下降到1%,H9c2(2-1)细胞融合发生得很快。
 
  培养大鼠心肌细胞时,需要注意以下几点:
 
  1、鼠龄选择:新生1~3d龄大鼠的心肌细胞在出生后3d内具有部分的增殖能力,而成年大鼠的心肌细胞则为终末分化细胞,不再具有分裂增殖能力。因此,建议选择1~3d龄的大鼠进行原代培养以获得更多活性心肌细胞。
 
  2、细胞复苏:溶解细胞过程要迅速,已溶解的冻存细胞不能在常温下存放太久,需要尽快离心去除DMSO。
 
  3、细胞冻存:推荐配比为55%基础培养基+40%FBS+5%DMSO的冻存液。在冻存时,尽量吹散细胞并注意控制吹打力度。
 
  4、细胞培养:培养条件为培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S,推荐传代比例为1:2~1:4,换液频率为2~3次/周,培养箱温度设定为37℃,5% CO2。传代操作包括:去掉培养皿中的培养基,加入PBS进行冲洗,去上清后加入0.25%胰酶进行润洗,去上清后放入CO2培养箱消化2~4min,加入培养基终止消化并吹打均匀。
 
  5、注意保持细胞汇合度在30%~90%,避免细胞过度生长和分化。
 
  6、每一步操作都要轻柔小心,以免对细胞造成损伤。
 
  7、选用优质培养基,减少有害物质对细胞的刺激。
 

免责声明

  • 凡本网注明“来源:化工仪器网”的所有作品,均为浙江兴旺宝明通网络有限公司-化工仪器网合法拥有版权或有权使用的作品,未经本网授权不得转载、摘编或利用其它方式使用上述作品。已经本网授权使用作品的,应在授权范围内使用,并注明“来源:化工仪器网”。违反上述声明者,本网将追究其相关法律责任。
  • 本网转载并注明自其他来源(非化工仪器网)的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点和对其真实性负责,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品第一来源,并自负版权等法律责任。
  • 如涉及作品内容、版权等问题,请在作品发表之日起一周内与本网联系,否则视为放弃相关权利。
企业未开通此功能
详询客服 : 0571-87858618